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濟南九望紫外可見近紅外分光光度計
1、基本工作原理
1）吸收的本質：分光光度法是利用物質對不同波長光的選擇吸收特性而建立起
來的分析方法。通常利用棱鏡或光柵分光來取得單色光，使單色光連續地依次通
過溶液，并測得該溶液對每一波長的吸收，得到吸收光譜曲線。
吸收光譜來源于物質對光的選擇吸收，這是物質的宏觀現象，而吸收的本質
是分子內部運動和光相互作用的結果。當物質的分子吸收一定能量或波長的光譜
后，透過的光譜中有些波長被吸收就形成了吸收光譜。吸收的能量愈小，則相應
的光的波長，吸收峰出現在較長波段。當吸收在紅外區時形成紅外吸收光譜，如
果吸收能量愈大，則相應的波長愈短，吸收峰出現在較短波段，當吸收在紫外區
產生紫外吸收光譜。
2）吸收定律—朗伯比耳定律：當一束平行單色光通過均勻的溶液時，其吸光度
與溶液的濃度和厚度的乘積成正比。
其數字表達式：A=KCL=LogI0/I=-LogT
吸收定律數字表達式成立的前提：①，入射光為單色光，②，吸收過程中各
物質無相互作用，各物質吸光度具有加和性，③，光與物質的作用*于吸收過
程，沒有熒光散射和光化學現象，④，吸收物是一種均勻分布的連續體系，
3）影響分光光度法的原因：
a，輻射與物質的非吸收作用引起的誤差，
b，熒光與光化學反應的影響，一般說來，熒光對分光光度測量產生的誤差
可以忽略，多數情況下顯色體系的熒光效率很小，而且熒光發射是各向同性，只
有一小部分沿著透射光方向進入檢測器，使測量吸光度偏低，產生負偏離。熒光
對吸收測量的影響*程度上決定于儀器的吸收池和檢測器光學設計，
c，反射和散射，吸收定律只適用于均勻介質的吸收體系，渾濁溶液因散射
使實測吸光度增加，導致偏離比耳定律，
d，儀器的非理想性引起的誤差，
e，復色光對比耳定律的偏離，大多數光度計只能獲得接近于單色光的狹窄
的光通帶，實際上仍是有復色光性質，可導致偏離比耳定律。偏離的大小取決于
二單色光的摩爾吸光系數差△ε，|△ε|很小時，可近似認為是單色光，在低濃
度時，工作曲線仍為直線，但濃度較大時，隨濃度增大，A-C曲線彎曲愈嚴重，
故比耳定律只適用于稀溶液，
f 雜散光，雜散光是指進入檢測器的處于待測波長光譜帶寬范圍外的不需要
的其它波長組分。其主要來源于分光光度計色散元件棱鏡或光柵、反射鏡、透鏡
表面的散射，單色器內壁灰塵及其它元件傷痕的反射和漫射等，雜散光可引起嚴
重的測量誤差。在儀器能量處于小的波長處，雜散光通常處于大值（如氘燈
220nm,鎢燈 340nm），
g，狹縫寬度，狹縫寬度不僅影響光譜的純度，也影響吸光度值。在定量分
析時，為了得到足夠的測量信號，應采用較大的狹縫，在定性分析時則采用較小
的狹縫，當出射狹縫和入射狹縫的寬度相等時，狹縫寬度引起的誤差小，
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h，波長標度尺的誤差，波長標度尺即儀器的波長準確度，如誤差較大或未
作校正，將光譜測量產生誤差，即影響吸光度測量的準確度（在吸收光譜的尖峰
處更為顯著），
i，不平行入射光的影響，比耳定律的前提條件之一是采用平行入射光束，
以保證全部光束通過同一厚度的吸收介質，當入射光束偏離平行性較大時，就明
顯導致偏離比耳定律。如果儀器中光束中等強度偏離平行性，引起的吸光度測量
誤差一般在 0.5%以內；
j，光度標尺的誤差，光度標尺即透射比準確度，其誤差大小直接影響光度
測量的準確度。
濟南九望紫外可見近紅外分光光度計