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北京締一生物科技有限公司

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檢測水中單增李斯特氏菌的HiMedia顯色培養基

閱讀:1187      發布時間:2019-10-21
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現在,市面上能見到的顯色培養基大多用于食品和臨床,但HiMedia廠家生產的顯色培養基覆蓋面廣,能用于供水行業和環境監測站。下面為您介紹一下。

 

顯色培養基的評價常有多個指標,如靈敏度,特異性等,它們也與所檢測的樣本類型有關。生產廠家經常不提供這些指標。但一些第三方檢測中心或研究機構對此則有相關研究,并發表在專業期刊上。

 

2011年,《學術研究期刊》發表了一篇對顯色培養基的比較研究。作者來自埃及國家研究中心水污染研究部,他們通過用顯色培養基檢測了水中的單核細胞增生李斯特氏菌,對顯色培養基進行了評價(見參考文獻1)。

 

作者指出,單核細胞增生李斯特菌是廣泛存在的食品致病菌,致死率較高(>20%)。它從家禽、鱒魚、壁虱、甲殼類,水、污水、植被、食品中已能被分離出來。對于人類而言,食品和水是常見的致病源。

 

傳統的培養法分離李斯特菌屬費力耗時,需要增菌乃至預增菌使水中低豐度的單增李斯特菌得到恢復。顯色培養基的出現可改善這一檢測方法。

 

研究者收集了尼羅河地表水的60個水樣本。收集水平遵照了200年APHA發布的指南。所有水樣均收集在無菌的1L玻璃瓶中(Simax品牌,捷克共和國產),并在4℃條件下運輸到實驗室。所有樣品在收集后6小時內進行細菌學檢查。

 

研究用的單增李斯特氏菌標準菌株編號為NCTC 10890。研究者采用了HiMedia公司生產的HiCrome Listeria Agar Base(以下簡稱HLA)。這款顯色培養基基于李斯特菌*的β葡萄糖苷酶與鼠李糖發酵。β葡萄糖苷酶裂解顯色底物,使得李斯特菌屬菌落呈現藍色,而其他菌屬為白色。李斯特菌的內部鑒別是基于鼠李糖發酵。單核細胞增生李斯特菌為藍綠色菌落。研究者還采用了另一個公司生產的BBL CHROMagar顯色培養基(以下簡稱BBL)。

 

研究遵循了2005年APHA指南,采用薄膜過濾法對單核細胞增生李斯特氏菌進行了檢測和計數。濾膜放置在培養基上,37℃倒置孵育24小時。對典型菌落計數,單位為CFU/100 ml。菌落的進一步確證采用PCR法。終計算得出靈敏度(真陽性率)、特異性(真陰性率)、總有效率(即(真陽性+真陰性)×100/總數),并進行統計學分析(t檢驗)。

 

結果見表1、表2、表3和表4。

 

表1. 在不同培養基上,單增李斯特氏菌標準菌株的菌落特征

菌株

培養基

陽性菌落

正確數 (%)

假陰性菌落

假陰性數(%)

單核細胞增生李斯特氏菌

HLA

藍綠色

31 (96.9)

白色

1(3.1)

BBL

藍綠色

30 (93.8)

藍色至藍綠色

2(6.2)

 

表2. 非單增李斯特菌菌株在不同培養基上的菌落情況

菌株

培養基

真陰性結果 (%)

假陽性結果(%)

E. coli O157:H7

HLA

10 (100)

0(0.0)

BBL

9 (90.0)

1(10.0)

 

表3. 培養基分離標準菌株的有效性

 

HLA

BBL

PCR

真陽

31

30

31

真陰

10

9

9

假陽

0

1

1

假陰

1

2

1

靈敏度

96.8%

93.7%

96.8%

特異度

100%

90%

90%

有效率

97.6%

92.8%

95.2%

 

表4. 60個尼羅河水樣在不同培養基上單增李斯特菌的假陽性率

 

分離株數量

假陽性數(%)

HLA

40

2(5.0)

BBL

40

5(12.5)

 

由上表可見,HiMedia的李斯特菌顯色培養基(HiCrome Listeria Agar Base)靈敏度為96.8%,特異度為100%,并已被PCR進一步確證,令人滿意,且好于另外一種品牌的顯色培養基。作者認為,HiMedia的李斯特菌顯色培養基不失為一種靈敏、快速、特異的方法,并且無須任何確證試驗。

 

HiMedia公司是微生物產品生產商,具有40多年生產研發經驗,具有WHO-GMP認證、ISO9001,ISO13485質量體系認證和CE、FDA注冊登記。產品已行銷世界上140多個國家。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。

 

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