動物細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)自上世紀(jì)初出現(xiàn)以來，經(jīng)歷了一個(gè)多世紀(jì)的發(fā)展，獲得了很大的進(jìn)步。不僅建立了許多細(xì)胞系和培養(yǎng)了許多類型的原代細(xì)胞，而且開發(fā)了人工合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基，并且出現(xiàn)了細(xì)胞工程，哺乳動物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)獲得了工業(yè)化的應(yīng)用，用于生產(chǎn)重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開發(fā)了微載體、中空纖維管和生物反應(yīng)器等，并且實(shí)現(xiàn)了一種不同以往的培養(yǎng)方式——灌注培養(yǎng)。目前，灌注培養(yǎng)已成為高產(chǎn)率培養(yǎng)細(xì)胞的主要方法。
灌注培養(yǎng)有四個(gè)特點(diǎn)：
一是能及時(shí)地補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)和排出代謝產(chǎn)物，有利于細(xì)胞的擴(kuò)增，實(shí)現(xiàn)高密度培養(yǎng)；
二是提供穩(wěn)定的環(huán)境，有利于細(xì)胞的持續(xù)增殖；
三是可實(shí)現(xiàn)梯度培養(yǎng)，如梯度培養(yǎng)箱的腔面和基底面分別用不同的培養(yǎng)液灌注，更接近體內(nèi)環(huán)境，可用于體外三維組織工程的構(gòu)建。
四是灌注培養(yǎng)檢測廢液中葡萄糖和乳酸濃度，進(jìn)而更清楚當(dāng)前細(xì)胞培養(yǎng)微環(huán)境情況。
灌注培養(yǎng)可用含血清的培養(yǎng)基。但無血清培養(yǎng)基已成為發(fā)展的趨勢。只是無血清開發(fā)成本高，應(yīng)用范圍窄，尚未全部替代含血清培養(yǎng)基。
目前市面上的血清品牌很多，可重點(diǎn)關(guān)注締一生物提供的進(jìn)口Ausbian精制新生牛血清。一般新生牛血清應(yīng)具有如下特點(diǎn)：
1. 內(nèi)毒素低，內(nèi)毒素選取小于3Eu/ml，可以使細(xì)胞更健康。對于客戶做實(shí)驗(yàn)更加順利。如果選取內(nèi)毒素較高的血清，細(xì)胞一直泡在毒液里，短期內(nèi)試不出結(jié)果，用不健康的細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成嚴(yán)重影響。
2. 原裝試用，保證后續(xù)供貨為同一個(gè)批次。客戶試用好后對于購買的血清更加有把握，同一批次已經(jīng)試過了，也保證了實(shí)驗(yàn)更加順利。
3. 同一個(gè)批次數(shù)量多，2000瓶，可以長期不用換批次。保證了實(shí)驗(yàn)更加順利的同時(shí)，節(jié)省了試用的時(shí)間和成本。
4. 多個(gè)批次可以選擇。不限一次試用，可以適應(yīng)不同課題。以保障實(shí)驗(yàn)順利。
5. 多個(gè)課題組，客戶在使用。相當(dāng)于多個(gè)角度測試該批次血清，說明血清對于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的支持，保證了實(shí)驗(yàn)順利。
符合要求的血清可用于細(xì)胞培養(yǎng)。
參考文獻(xiàn)
唐光霞, 陳建蘇. 灌注動物細(xì)胞培養(yǎng)及其在組織工程中的應(yīng)用進(jìn)展.眼科新進(jìn)展.2010,30(5):486-491
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