9上皮細胞體外培養的特殊條件
(1)防范微生物污染：
根據上皮組織分布的特性，位于體表或襯貼消化道、呼吸道內等處的上皮組織，直接暴露或同外環境相接觸，組織本身帶有各種病原微生物或受其污染的機會較多。
要求在組織取材時就嚴格滅菌；
分離、種植、培養等諸多操作步驟上都要設法消除可能會出現的微生物污染。
培養中所使用的各種液體，包括細胞保存液、分離液以及培養基等需添加抗生素，抗生素濃度比其它組織培養高。
(2)生長基質的支持：
上皮細胞依賴貼附于某種支持物上才能生長，即所謂的貼壁依賴性細胞。
在培養器皿表面包被生長基質，如膠原或其它細胞外基質成分等，模擬體內的基膜結構，不僅特別有利于上皮細胞的貼附和生長，也有利于培養細胞的分化．使細胞極性表現更為明顯。
(3)特殊的培養基：
培養基有M199、RPMl 1640、DMEM和HamFl2。
其中以M199和RPMl 1640較為常用。
M199和RPMI1640培養基僅適用于上皮組織的短期培養和維持其生存，對上皮組織的長期培養和促增殖作用并不明顯。
DMEM和HamFl2培養基用于上皮組織培養時有其特殊作用。
可促進上皮細胞的貼附；
維持上皮細胞在體外培養狀態的分化。
HamFl2培養基的特殊性
特別適用原代上皮細胞的培養，培養基成分中添加微量元素的無機離子，更加利于細胞的生長和代謝。
在實際培養時，將DMEM與HamFl2按一定比例混合用于上皮組織培養。
加入血清，但出廠血清成分復雜，含有一定量的有毒物和抑制物。
(4)去除成纖維細胞：
上皮組織借薄層基膜和結締組織相連。
取材分離細胞時會帶入少量結締組織成分，常常造成成纖維細胞與上皮細胞混和生長。由于成纖維細胞具有增殖能力和粘附能力強的特點，很容易“瘋長"為培養物中的優勢細胞群，從而干擾或抑制上皮細胞的生長，成為上皮細胞的“細胞污染源"。
因在上皮細胞的取材、分離、種植和傳代的培養過程中，要特別注意上皮細胞的純化，去除和抑制成纖維細胞的生長。
內皮細胞：
來源：人臍帶臍靜脈，動物動脈
消化：用膠原酶比胰蛋白酶消化好。
但要注意掌握消化時間和雜細胞（成纖維細胞和平滑肌細胞）。
內皮細胞的鑒定
用免疫組化染色檢測VIII因子相關抗原和CD34抗原, 鑒定內皮細胞。
觀察細胞是否呈單層貼壁生長, 細胞形態，如長梭形、多角形三角形、四邊形為主, 呈典型的“鋪路石"樣征象 ；
觀察第三代細胞純度是否達95%以上。
如消化時間過長或操作不慎、刮取過重時，會造成血管內皮下層與外膜成纖維細胞以及中膜平滑肌細胞污染。由于這些雜細胞生長較快，隨著傳代次數越多，其污染的程度越重，從而使培養失敗。
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