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抗體的保存方法
抗體的保存方法
抗體保存得當(dāng)與否，直接決定了抗體的活性和使用效果！如果抗體保存得當(dāng)，大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。下面讓我們一起來看看抗體的保存方法吧！
一、保存溫度和條件
很多抗體的最佳保存條件是分裝成小包裝凍存于-20°C或-80°C。分裝能使凍融引起的損失減到最小，同時可避免多次在一個管內(nèi)取樣而由槍頭引入的污染。分裝凍存的抗體，融解一次后剩余抗體應(yīng)保存于4°C。收到抗體后，應(yīng)10,000 xg離心20秒，使管口螺紋內(nèi)的抗體溶液全部離心至管底，用低蛋白吸附性的微量離心管分裝。分裝量的多少取決于每次試驗(yàn)的使用量。分裝量不能少于10μl；分裝量越少，由于蒸發(fā)和吸附于管內(nèi)壁而引起的損失會越大。
二、特殊情況
1.酶聯(lián)抗體，不應(yīng)凍存，4°C可保證穩(wěn)定。凍融會降低酶的活性，同時影響抗體的吸附能力。
2.偶聯(lián)標(biāo)記的抗體，無論是標(biāo)記的熒光染料、酶還是生物素，都應(yīng)保存于深色的管內(nèi)并包裹上鋁箔。如果暴露在光線下可能會減弱偶聯(lián)標(biāo)記物的活性。熒光標(biāo)記物尤其容易受到光漂白作用，整個實(shí)驗(yàn)過程中均應(yīng)避光。
3.免疫球蛋白G3同種型抗體凍融后易形成聚合物，因此應(yīng)一直保存于4°C。
三、凍存/復(fù)蘇的損失
反復(fù)凍融可使抗體變性，使其形成聚合物而降低了抗體結(jié)合能力。
大多數(shù)抗體在-20°C保存就足夠了，沒有必要置于-80°C保存。千萬不要使用無霜的冰箱。反復(fù)凍融能減少霜的形成，但這正是應(yīng)該避免的。同理，抗體應(yīng)該放置于冰箱中溫度變化最小的部位，如應(yīng)放置于冰箱格里，而不應(yīng)放置于冰箱門上。
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