化工儀器網(wǎng)
資料下載
小鼠骨髓細胞染色體標本制備實驗步驟
閱讀：1284 發(fā)布時間：2017-4-18| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 15KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 92次 | |
| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 1284次 |
| 免費下載 | 點擊下載 |
預處理→取股骨→沖洗骨髓→離心→低滲→離心→固定→離心→滴片→染色→觀察
1．預處理：實驗前2.5-3小時，按每克體重注射0.02ml，給小白鼠腹腔注射秋水仙素。
2．取股骨：斷頸處死小鼠后，剔去肌肉組織，洗凈
3．沖洗骨髓：剪去兩端的股骨頭，吸取 10ml 2%檸檬酸鈉，注射 器針頭插入股骨一端,反復沖洗兩根股骨，洗液收集到10ml的離心管中
4 ．離心： 1000r/min 離心10 min ,棄上清
5 ．低滲：加入8ml 0.075mol/LKCl溶液,滴管吹散,37℃水浴低滲30 min ，中間（約15 min ）再吹散一次，使細胞分散，懸浮于溶液中
6．離心：1000r/min離心10 min，棄上清
7．固定：沉淀加8ml固定液，并用吸管輕 輕吹勻，進行固定，中間（約15 min ）再吹散一次
8. 離心： 1000r/min 離心10 min ,留1 ml 左右上清，輕輕吹打成細胞懸液
9. 滴片：用吸管吸取細胞懸液，高度30-40 cm，滴在預冷的載玻片上，在酒精燈火焰上微微加熱，室溫晾干
10. 染色：改良石炭酸品紅染色10-20 min
11. 觀察：低倍———高倍