詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:phosphodiesterase抑制劑(R 80123)
英文名稱:R 80123
產品規格:1mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
R80123是R79595的Z異構體,也是一個高的選則性的phosphodiesterase的抑制劑,他的作用和(HY-100615,Revizinone)R80122相似。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:133718-30-6 分子量:459.54 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蒼耳子(標準品)英文名稱: dCDP, 2'-Deoxycytidine-5'-Diphosphate,3sodium saltFAM36A蛋白抗體包裝10MG
蒼術(茅蒼術)(標準品)英文名稱: DMPFAM50A蛋白抗體包裝100g
蒼術苷A英文名稱: Dodecyl gallateFAM134C蛋白抗體包裝25g
蒼術(標準品)英文名稱: dUMP, 2'-Deoxyuridine-5'-monophosphate, disodium salt凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體包裝5g
藏菖蒲(標準品)英文名稱: Indoxyl-Glucoside乙型肝炎病X蛋白反轉錄蛋白9抗體包裝25g
藏紅花英文名稱: Lanthanum(III) oxide卵泡抑相關蛋白5抗體包裝5g
藏木香(標準品)英文名稱: Magnesium chloride, hexahydrate叉頭相關轉錄因子C2抗體包裝100g
草果(標準品)英文名稱: Manganese (II) acetate, tetrahydrateFbx15蛋白抗體包裝25g
草烏(標準品)英文名稱: Neuraminidase from Clostridium perfringensFRMD2蛋白抗體包裝5g
草玉梅(標準品)英文名稱: Nickel (II) acetate, tetrahydrateFAM98B蛋白抗體包裝100ml
草質(標準品)英文名稱: Nile redFAM50C蛋白抗體包裝25ml
草質苷(標準品)英文名稱: N-PhenylureaFAM91A1蛋白抗體包裝1g
側柏葉(標準品)英文名稱: Okadaic acid, free acidFRMD1蛋白抗體包裝5g
梣(標準品)英文名稱: Okadaic acid, sodium salt髓鞘缺陷相關蛋白抗體包裝25MG
茶黃(標準品)英文名稱: Potassium carbonate, hydrate叉頭蛋白B1+B2抗體包裝1g
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質量規格:>99%食欲/阿立新B試劑盒去氧紫草;Deoxyshikonin
地中海馬特爾氏菌Martelella│mediterranea 質量規格:>98.5%,BR生長抑試劑盒千金子二萜二乙酰酰酯;Euphor
環帶擬盤多毛孢Pestalotiopsis│zonata 質量規格:>97%生長激釋放肽ghrelin試劑盒20-去氧巨大戟萜;20-deoxyi
phosphodiesterase抑制劑(R 80123)性成纖維生長因子(多肽抗原)吉它霉(標準品)Human
血管緊張轉換2抗原己內酰(標準品)Human
腦鈉(多肽抗原)加巴噴?。藴势罚?/span>Human, Mouse, Rat
生物化腦鈉多肽加替沙星(標準品)Human, Mouse
過敏C5(補體C5)抗原蝶呤(標準品)Human, Mouse
卵巢癌抗原蝶呤二鈉鹽 (標準品)Human, Mouse, Rat
Caspase 激活的脫氧核糖核(抗原)磺丁脲(標準品)Human, Mouse
肌紅蛋白抗原咪唑Human, Mouse, Rat
鈣調節蛋白-1(抗原)咪唑(標準品)Human, Mouse, Rat
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)