詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CNX-774 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
CNX-774是高效Btk抑制劑,IC50<1nM,能與活性位點上的Cys-481形成配體導向的共價鍵。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1202759-32-7 純度:99.74% 分子量:499.5 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
小鼠轉化生長因子β(TGFβ1)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβ1 ELISA Kit
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA檢測試劑盒MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T
人抗SS-B/La抗體免疫試劑盒 Human SS-B/La Aibody,ELISA Kit
Rabbitα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞IL蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISA試劑盒人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠白介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1B ELISA Kit
魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)免疫試劑盒 Human 1,5-anhydroglucitol(1,5-AG)ELISA Kit
英文名稱MouseCCL26ELISAKit小鼠CCL26規格:96T/48T
冰凍切片組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50次
RatEotaxin1ELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規格:96T/48T
豬神經特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human kallikrein 6 (KLK 6) ELISA Kit 人激肽釋放酶6(KLK 6)ELISA試劑盒
GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANG(HumanAngiogenin)ELISAKit人血管生長素規格:48T/96T
血液脯氨酸(proline)含量比色法定量檢測試劑盒20次
PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Btk抑制劑(CNX-774)STAT1 p84+p91 英文名稱: 信號轉導與轉錄激活因子1抗體 0.2ml
FOXM1 英文名稱: 叉頭蛋白M1抗體 0.2ml
髓樣分化蛋白抗體 Anti-MyD88 0.1ml
Anti-Sema6A/FITC 熒光素標記抗Sema6A抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PARK2(Ser378) 磷酸化帕金蛋白抗體 規格 0.1ml
AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor) 晚期糖基化終末產物特異性受體(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg