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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CDK9-IN-2 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
CDK9-IN-2是一種特異性的CDK9抑制劑，詳細信息請參考WO/2012131594A1中的化合物CDKI(8)。CDK9-IN-2作用于H929多發性骨髓瘤(MM)細胞系(72小時)和A2058黑色素瘤細胞系(72小時)，IC50分別為5nM和7nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1263369-28-3 純度：99.83% 分子量：425.93 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
胡椒(白胡椒)（標準品）英文名稱： Methyl ricinoleate磷化脂肪型脂肪結合蛋白包裝5g
胡椒(黑胡椒)（標準品）英文名稱： Methyl behenate脂肪結合蛋白12抗體包裝1g
胡椒堿(標準品)英文名稱： Methyl tetracosanoate四連接同源蛋白FJX1抗體包裝5g
胡蘿卜苷(標準品)英文名稱： Methyl cis-13-docosenoateG蛋白偶聯受體γ3抗體包裝1g
胡麻屬苷（標準品）英文名稱： Nonadecanoic AcidG蛋白偶聯受體γ7抗體包裝25g
湖北貝母（標準品）英文名稱： Oleic acidG蛋白結合蛋白α13/Gα13抗體包裝5g
葫蘆巴（標準品）英文名稱： trans-9-Octadecenoic methyl esterG蛋白結合蛋白α16/Gα16抗體包裝100mg
葫蘆巴堿（標準品）英文名稱： Para RedG蛋白α抑制劑抗體包裝100g
葫蘆巴堿鹽鹽（標準品）英文名稱： Petroselinic acidG蛋白受體α x+z抗體包裝25g
葫蘆A英文名稱： D-Panthenol半乳糖神經酰抗體包裝500g
葫蘆B(標準品)英文名稱： Saccharin sodium salt solution磷化葡萄糖合成1抗體包裝100ml
葫蘆D;葫蘆苦D英文名稱： γ-Undecanolactone半乳糖凝集3抗體包裝25ml
葫蘆E（標準品）英文名稱： 2-Undecanone生長因子受體結合蛋白7抗體包裝1g
槲寄生（標準品）英文名稱： 2′-Deoxycytidine hydrochloride糖基轉移1結構域1抗體包裝5g
槲皮苷(標準品）英文名稱： Ammonium phosphatedi basicG蛋白偶聯受體LGR7蛋白抗體包裝1g
高溫放線菌屬Thermoactinomyces│sp. 質量規格：>98%,BR絨毛膜促性腺激試劑盒普拉洛芬;Pranoprofen
藻瑚菌Multiclavula│mucida (Pers.) R.H. Petersen 質量規格：HPLC>99%,標準品相關血漿蛋白A試劑盒派利文堿;Perivine
安卡紅曲Monascus│anka 質量規格：>98.5%,USP,BR特異性蛋白B試劑盒霹靂蘿芙木堿;Perakine
CDK9抑制劑(CDK9-IN-2)血小板源性生長因子受體-B（抗原）嗎替麥考酚酯/霉酚酯（標準品）Human
外周髓鞘蛋白-22多肽麥白霉（標準品）Human, Mouse
磷脂酰肌激（抗原）麥迪霉（標準品）Human, Mouse
骨形態發生蛋白4（抗原）麥芽三糖(標準品)Human, Mouse, Rat
小鼠胎盤生長因子（多肽抗原）麥芽糖（標準品）Human
胎盤生長因子（多肽抗原）沒食子乙酯(標準品)Human, Mouse, Rat
人胎盤生長因子（多肽抗原）霉酚; 麥考酚（標準品）Human, Mouse, Rat
蛋白磷酯-1（抗原）美(標準品)Human, Mouse, Rat
骨成型蛋白受體1A抗原美羅培南(標準品)Human, Rat
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