小鼠視乳頭星形膠質原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠視乳頭星形膠質細胞分離自視神經乳頭；視乳頭位于黃斑區鼻側附近，境界清楚，呈白色、圓盤狀，因此也稱為視盤。視網膜上視覺纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭中央有一小凹陷區，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視神經纖維聚合組成視神經的起始端，它沒有視細胞，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點。視乳頭是開角型青光眼早受損的部位，星形膠質細胞是視神經乳頭處主要的膠質細胞類型，可為視網膜神經節細胞無髓鞘的軸突提供結構和生物支持。導致視網膜神經節細胞喪失的病理生理機制尚未闡明，神經膠質細胞對調控神經元微環境起多重作用，越來越多的證據表明膠質細胞町能對神經系統發育、損傷、修復及再生起極為關鍵的作用。視乳頭星形膠質細胞胞體多扁平，體積較大，形狀多呈不規則的多邊形，突起較粗，胞核為橢圓形，核仁清晰可見，核周有較密集物質，胞質稀疏，骨架結構良好，明顯不同于長梭形的成纖維細胞形態。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠視乳頭星形膠質細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法、結合差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠視乳頭星形膠質細胞經GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3 IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL  NIH/3T3(小鼠胚胎細胞)     KM3, 人多發性骨髓瘤細胞 肝癌細胞,HCC-9204細胞 NCI-H292(肺癌細胞(淋巴結轉移)) 人原代胰島細胞 大鼠原代輸卵管平滑肌細胞

白介素2(IL2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 2 (IL2)

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標簽)

XCL1重組小鼠 XCL1 蛋白 Protein

IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白

CKB重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白 Protein

大鼠甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素(MBP/MBL)試劑盒 ，英文名： MBP/MBL ELISA Kit

Porcine esadiol (E2) ELISA Kit 豬雌二醇(E2)試劑盒

瘧原蟲(Pm)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforM-CSF(HumanMacrophageColony-StimulatingFactor)ELISAkit人巨噬細胞集落刺激因子

體液砷元素比色法定量試劑盒20次

ELISAKitC3bR綿羊補體片段3b受體

小鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)試劑盒   96T/48T

小鼠游離甲狀腺素(FT4)試劑盒   96T/48T

小鼠游離睪(F-TESTO)試劑盒   96T/48T

小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒   96T/48T

小鼠視乳頭星形膠質原代細胞小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Lyme IgG (Lyme-IgG) ELISA Kit 人萊姆IgG(Lyme-IgG)試劑盒

Humanα-GlucosidaseELISAKit 人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor(MAGAb)ELISAKit大鼠抗髓鞘相關糖蛋白抗體

嬰兒配方食品(S-Methylmethionine)比色法定量試劑盒20次

MouseIerleukin27,IL-27ELISAKit小鼠白介素27(IL-27)試劑盒規格：96T/48T

PDGFC重組食蟹猴 PDGF-C / PDGFC 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta 0.5mgHSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β (抗原)

CA4重組人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 蛋白 Protein

CD3D Protein Human 重組人 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc & FLAG 標簽)

SEMA3A Protein Mouse 重組小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 標簽)