人食管平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人食管平滑肌細胞分離自食管組織；食管可分為頸段、胸段和腹段，脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，肌層上1/3段為骨骼肌，下1/3為平滑肌，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中，肌纖維的排列方式分為內環形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制，食管還有括約肌，位于環狀軟骨水平的，稱為食管上括約肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿過膈孔，另一部分在膈下的高壓帶，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的人食管平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人食管平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

PC-3 人前列腺癌細胞  牦牛皮膚細胞;BMU-S1  EPD5 Others Human 人 EPD5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   SERPINB3C Others Mouse 小鼠 Serpinb3c 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 兔原代淋巴管成纖維細胞 小鼠原代腸肌成纖維細胞

甘丙肽(GAL)重組蛋白 Recombinant Galanin (GAL)

IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白

PTPN6重組小鼠 PTPN6 蛋白 (aa 207-597, His & GST 標簽) Protein

FCGR3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD16 / FCGR3 蛋白 (His & AVI 標簽)

SPHK1重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠巨噬細胞來源趨化因子(MDC)試劑盒 ，英文名： MDC ELISA Kit

Mouse lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 小鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒

Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFN(MouseFibronectin)ELISAKit小鼠纖連蛋白

細胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量試劑盒25次

RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)試劑盒規格：96T/48T

小鼠釋放激素   英文名稱：   Mouse Gonadoopin-Releasing Hormone   規格：      英文縮寫：   GH

小鼠葡萄糖氧化酶   英文名稱：   Mouse Glucose Oxidase   規格：      英文縮寫：   GOD

小鼠胰高血糖素   英文名稱：   Mouse Glucagon   規格：      英文縮寫：   GC

小鼠葡萄糖60酸脫氫酶   英文名稱：   Mouse Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase   規格：      英文縮寫：   G6PD

人食管平滑肌原代細胞小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細胞外信號調節激酶(ERK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒規格：96T/48T

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒規格：96T/48T

CREG1重組小鼠 CREG / CREG1 蛋白 Protein

睪素2(TIC2)重組蛋白 Recombinant Testican 2 (TIC2)

MAPK12重組人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

CD200R1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200R / OX2-R 蛋白