詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
R-7128 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
R-7128是一種核苷HCV NS5B polymerase抑制劑,用作RNA鏈終止子,且在復制期間防止RNA轉錄物的延長。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:940908-79-2 別名:RG 7128;Mericitabine;PSI 6130 diisobutyrate 純度:99.34% 分子量:399.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
大波斯菊苷,芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準...英文名稱: Sulbactam Sodium核蛋白4抗體(Ran結合蛋白4)包裝100g
大車前苷(標準品)英文名稱: 18-beta-glycyrrheticacid免疫球蛋白重鏈可變區抗體包裝25g
大豆苷,黃豆苷 (標準品)英文名稱: 18-beta-glycyrrheticacid胰島樣生長因子結合蛋白7抗體包裝100ml
大豆,黃豆苷元(標準品)英文名稱: Tryptone 胰島樣生長因子結合蛋白6抗體包裝500ml
大風子(標準品)英文名稱: β-NaphthoflavoneKB抑制蛋白激ε包裝500mg
大腹皮(標準品)英文名稱: Clorsulon整合β4抗體包裝5MG
大果木姜子(標準品)英文名稱: Clorsulon磷化白介-7受體a抗體包裝1g
大紅袍(標準品)英文名稱: Sodium L-ascorbyl-2-phosphate磷化胰島受體底物-1抗體包裝5g
大黃(掌葉大黃)(標準品)英文名稱: 3-Isobutyl-1-methylanxthine磷化胰島受體底物2抗體包裝1g
大黃(藥用大黃)(標準品)英文名稱: Procaine hydrochloride磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝250mg
大黃酚(標準品)英文名稱: Procaine hydrochloride磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝5g
大黃酚-8-O-葡萄糖苷(標準品)英文名稱: Vorinostat impurity磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝1g
大黃(標準品)英文名稱: Swertianolin磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝5g
大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)英文名稱: saponin磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝1g
大黃(標準品)英文名稱: Aloperine磷化整合連接激1抗體包裝250mg
: =ATCC12344=DSM20565=NCTC8198資源名稱: 釀膿鏈球菌 質量規格:≥98%可溶性CD40ELISA Kit4-磺酰基肼鹽鹽;4-Sulfon
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:HPLC≥98%,標準品可溶性CD38試劑盒亥茅酚苷;Sec-O-Glucosylh
粉紅擲孢酵母Sporobolomyces│roseus 質量規格:≥99.0%,BR可溶性CD30配體試劑盒;Progesterone
核苷HCV NS5B polymerase抑制劑(R-7128)魚骨鈣/骨谷蛋白具棲冬青苷(標準品)Human
大鼠表皮生長因子受體瞿麥(標準品)Human, Mouse, Rat
小鼠骨退化特異標志物卷柏(墊狀卷柏)(標準品)Human, Mouse, Rat
小鼠Ⅰ型膠原C端肽卷柏(卷柏)(標準品)Human, Mouse
大鼠白介2可溶性受體決明蒽醌;美決明子(標準品)Human, Mouse
紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白決明子(標準品)Human, Mouse, Rat
兔心肌特異性肌鈣蛋白T決明子(小決明)(標準品)Human, Mouse
人黏膜地址黏附分子爵床(標準品)Human, Mouse, Rat
兔溶菌咖啡乙酯(標準品)Human