詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
2×100ml|2×500ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途: 血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色 注意事項: 含磷酸鹽緩沖液,等量混合后使用。對胞質染色較好,主要成分為瑞氏色素。 儲存條件:室溫,避光,24個月 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
巨大芽胞桿菌自噬相關蛋白18抗體Human MARVELD3 ELISA Kit豬白介22(IL-22)免疫試劑盒
杏鮑菇自噬相關蛋白4A抗體Human MAS1L ELISA Kit豬白介2(IL-2)免疫試劑盒
鮮綠青霉載脂蛋白A4抗體Human MAST1 ELISA Kit豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒
芽孢桿菌12脂氧合抗體Human MAST3 ELISA Kit豬白介1β (IL-1β)免疫試劑盒
血紅紅曲菌血管緊張III抗體Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit豬白介1α(IL-1α)免疫試劑盒
乳桿菌屬腺苷環化3抗體Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit豬白介18(IL-18)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種血管動蛋白抗體Human Caspase 12 ELISA Kit豬白介17(IL-17)免疫試劑盒
水稻漢納酵母腺病早期E1A蛋白抗體Human CD320 ELISA Kit豬白介15(IL-15)免疫試劑盒
球形賴芽孢桿菌磷化活化復制因子2抗體Human C1orf31(Cytochrome c oxidase assembly factor 6 homolog) ELISA Kit豬白介13(IL-13)免疫試劑盒
Aureimonas pseudogalii磷化活化復制因子2抗體Human TMPRSS15(Enteropeptidase) ELISA Kit豬白介12(IL-12/P70)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化失調癥蛋白1抗體Human SPAST(Spastin) ELISA Kit豬白介12(IL-12/P40)免疫試劑盒
香菇錨蛋白重復結構域蛋白17抗體Human MLKL(mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit豬白介10(IL-10)免疫試劑盒
果生假絲酵母胞質乙脫氫1抗體Human TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20 homolog) ELISA Kit豬白介1(IL-1)免疫試劑盒
天藍色鏈霉菌ADP核糖基化樣因子ARL3抗體Human HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) ELISA Kit豬白蛋白免疫試劑盒
三葉草根瘤菌花生四烯15脂氧合1抗體Human MVK(Mevalonate kinase) ELISA Kit豬γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
解幾丁質纖維單胞菌癌增強蛋白2抗體Human CD97(CD97 antigen) ELISA Kit豬γ淀粉(AMY)免疫試劑盒
羅伊赫海源菌Idiomarina│loihiensis 質量規格:比活度:>5000 U/mg,BC烯試劑盒鹽
硫色曲霉Aspergillus│sulphureus 質量規格:>98%,植物激級脫氫E1試劑盒乙氧基血根堿
青霉屬Penicillium│sp. 質量規格:>98.0%,BR激R型同工試劑盒遠華蟾蜍精
邁格林華染色液(May-Grunwald Stain)仁果殼小圓孢 苯并呋喃-3-酸弓形蟲IgM抗體Elisa
嗜熱脂肪地芽孢桿 2-氨基-3-甲氧基酪蛋白Elisa
耐寒短桿 反式-(1R,2R)-2-氨基環戊鹽酸鹽a膠質系來源的神經營養因子Elisa
黑曲霉 2,4-二-5-基嘧啶b膠質系來源的神經營養因子Elisa
西宮皮生球 3-甲基-1H-吲唑乙型肝炎病表面IgG抗體Elisa
阿魏側耳 3,3'-雙噻吩絡絲蛋白Elisa
枯草芽孢桿 N,1-雙(叔丁氧羰基)-L-組氨酸雙環己鹽抗神經節苷脂抗體Elisa
蘇云金芽孢桿 2-甲基-5-甲氧基反神經調節苷脂抗體Elisa
佛雷德里克斯堡假單胞 2-氨基嘧啶-5-羧酸神經節苷脂Elisa
單胞屬 *貝特6-磷酸果糖激-1Elisa
灰略紅鏈霉 甲基-4,6-O-亞芐基-Α-D-吡喃葡糖苷II型膠原蛋白Elisa
大腸埃希氏 3,5-二羥基苯甲酰肥大蛋白Elisa
草菇 2-氨基-3--5-26S蛋白體Elisa
禿裸鏈霉 O-乙基異脲鹽酸鹽嗜酸性粒過氧化物Elisa
Actinokineospora 2-二苯并[b,f][1,4]氧氮雜卓-11(10H)-酮凝血因子ⅡElisa