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詳細介紹
商品介紹：
Oleanonic acid是一種三萜,可以抑制HIV-1對細胞的感染。起抑制HIV-1體外感染PBMC,自然感染PBMC和單核細胞/巨噬細胞的EC50分別為22.7mM,24.6mM和57.4mM。除此之外,它可以抑制鼠腹腔白細胞產生白三烯B4，IC50為17μm。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：17990-42-0 別名：3-Oxooleanolic acid 純度：98.0% 分子量：454.68 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Oleanonic acid | 1mL(10mM)|50mg | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
阿姆斯特丹曲霉Saccharomyces cerevisiae
球毛殼Saccharomyces cerevisiae
多色青霉Saccharomyces cerevisiae
嗜熱脂肪地芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
云芝Saccharomyces cerevisiae
花生網斑病*Saccharomyces cerevisiae
金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）Saccharomyces cerevisiae
Paraburkholderia sp.Saccharomyces cerevisiae
其他質粒菌種Saccharomyces cerevisiae
黃曲霉Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
Chryseobacterium jejuenseSaccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌Saccharomyces cerevisiae
淡紫擬青霉Saccharomyces cerevisiae
小鼠MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)免疫試劑盒骨形態發生蛋白8抗體人腺病抗原(ADV-Ag)雙草鹽
小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒骨形態發生蛋白6抗體人腺病抗原(ADV-Ag)雙醋瑞因
小鼠L-乳脫氫A鏈(LDH-A)免疫試劑盒磷化Bcl-2抗體人旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)雙氫
小鼠L解(PAL)免疫試劑盒磷化Bcl-2抗體人旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)雙去氧基姜黃
HIV-1抑制劑(Oleanonic acid)S100A10 英文名稱： S100鈣結合蛋白A10抗體 0.2ml
Eph receptor A2+A3+A4 英文名稱： 內皮細胞受體蛋白酪酸激酶A2+A3+A4抗體 0.2ml
平足蛋白抗體 Anti-Podoplanin Protein 0.1ml
Anti-STK/CK II Alpha/FITC 熒光素標記屬絲/蘇氨酸蛋白質激酶抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MST1R(Ser1349) 磷酸化原癌基因c-Met相關酪氨酸激酶抗體 規格 0.1ml
Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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