①先接通電源，打開電源開關1，指示燈亮，打開比色皿暗箱蓋8，預熱20分鐘。
②波長選擇旋鈕6，選擇所需的單色光波長，用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。
③放入比色皿，旋轉零位旋鈕5調零，將比色皿暗箱蓋合上，推進比色皿拉桿3，使參比比色皿處于校正位置，使光電管見光，旋轉透光率調節旋鈕4，使微安表9指針準確處于。按上述方法連續幾次調整零位和位，即可進行測定工作(儀器面板見 圖5-6) 。
實驗室分光光度計使用和維護中應注意事項：
①連續使用儀器的時間不應超過2小時，*好是間歇0.5小時后，再繼續使用。
②比色皿每次使用完畢后，要用去離子水洗凈并倒置晾干后，存放在比色皿盒內。在日常使用中應注意保護比色皿的透光面，使其不受損壞或產生劃痕，以免影響透光率。
③儀器不能受潮。在日常使用中，應經常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部) 是否變色，如硅膠的顏色已變紅，應立即取出烘干或更換。
④在托運或移動儀器時，應注意小心輕放
三大注意事項
1.分光光度計應放在干燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的工作臺上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。
2.分光光度計使用前，使用者應該先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。
3.分光光度計在儀器尚未接通電源時，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進行調節。
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