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NR8383-NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞/鏡像綺點(iCell)
  • NR8383-NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞/鏡像綺點(iCell)
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貨物所在地:上海上海市

地: 上海市徐匯區聚科生物園銀都路4

更新時間:2025-06-23 09:38:07

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NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞/鏡像綺點(iCell)
NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞介紹
NR8383 (正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞,并三次用軟瓊脂亞克隆

NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞/鏡像綺點(iCell)介紹

NR8383 (正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現出巨噬細胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,Fc受體,氧化降解;分泌IL-1, TGF-β和IL-6,可重復地響應外源生長因子。NR8383細胞響應博萊霉素,分泌TGF-β前體。在博萊霉素刺激下,TGF –β mRNA表達也上升。細胞對內毒素敏感。1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達50%。 即使達到0.001毫克/毫升的水平,LPS抑制還是無毒且在后續過程中可逆的。NR8383細胞株提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源,可以用于體外研究巨響細胞相關活性。

 

NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞/鏡像綺點(iCell)特性

1) 來源:肺;巨噬細胞 

2) 形態:巨噬細胞,半懸浮生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。

 

 

細胞接收后的處理:

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3) T25瓶中的培養基取出離心后,去上清,添加6ml新的*培養基,重新加入原T25培養瓶。

4) 如果細胞長滿80-90%請及時進行細胞傳代,傳代培養用本公司附帶的*培養基。

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。

 

細胞用途:僅供科研使用。

                       

細胞培養操作規程,供參考

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備F-12K培養基;優質胎牛血清(熱滅活),15%;L-谷氨酰胺,2mM;雙抗,1%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養,補加培養基至6ml。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 將上清取出保留,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出,和上清一起在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。*次傳代為1:2。

下面T25瓶為類;

1,細胞凍存時,取出上清,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:

        一、原代細胞服務:
               各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
               多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
               原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等
               原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務

        二、細胞系服務:
               細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書
               細胞系培養過程的技術指導
               細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等

        三、iPS細胞服務:
               iPS細胞基礎培養(有滋養層or無滋養層)
               iPS細胞增殖及冷凍保存
               iPS基礎培養技術實習
               新藥及實驗儀器上市前評估

        四、其他技術外包服務、客戶定制服務等

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司

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