您好, 歡迎來到化工儀器網
9
產品簡介
I-Blue 中量質粒提取試劑盒（無內毒素）使用預裝的陰離子交換樹脂柱從50-150 ml培養的細菌中純化質粒DNA。
詳細介紹
I-Blue 中量質粒提取試劑盒（無內毒素）使用預裝的陰離子交換樹脂柱從50-150 ml培養的細菌中純化質粒DNA。試劑盒中包含I-Blue裂解緩沖液 Lysis Buffer（可選的顏色指示），以防止常見的操作錯誤，從而確保有效的細胞裂解和SDS沉淀。在重新懸浮步驟中添加了I-Blue裂解緩沖液，然后添加了PM2緩沖液。加入PM2緩沖液后，在混合過程中，樣品將*變成藍色時，樣品將開始變成藍色。無色區域或棕色團塊表明裂解不*，應繼續混合直至樣品*變藍。在中和步驟中，添加PM3緩沖液，劇烈搖動試管將開始使樣品變回中性色。一旦樣品*無色，中和就完成了。現在可以添加PER緩沖液以去除內毒素。現在可以完成純化質粒DNA的結合，洗滌和洗脫。
由于分離柱的高效率，整個過程無需超速離心機，HPLC或其他有毒試劑，即可在80分鐘內完成。純化的質粒DNA適用于轉染，測序反應，酶連接，PCR，體外轉錄，顯微注射，限制性內切酶切和基因槍。
通過從50 ml過夜培養的E.coli(DH5α)中分離質粒DNA，逐批測試了無內毒素質粒提取試劑盒的質量。大腸桿菌（DH5α）培養物，含有pBluescript（A600> 2U / ml）。經過純化過程，產量超過250 µg，A260 / A280比在1.8-2.0之間。純化的質粒（1 µg）用于EcoRI消化，并通過電泳進行分析。