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武漢艾美捷科技有限公司
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艾美捷FLIVO探針:用于細胞活體凋亡檢測,助力科研!

時間:2022/12/8閱讀:217
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細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡,乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此,有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。

 

FLIVO®(熒光活體)是一種強大的無創檢測體內半胱天冬酶活性的方法。NIR-FLIVO 690示蹤劑是caspases的非細胞毒性、細胞透過熒光抑制劑,優化用于整個活體動物。ICTNIR-FLIVO 690示蹤探針包含大多數caspases (Val-Ala-AspVAD)的好的選擇結合序列。

 

接下來咱就聊一聊艾美捷ImmunoChemistryICTFLIVO探針——用于細胞凋亡活體檢測,助力大家高精度檢測

 

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一、艾美捷FLIVO探針活體凋亡檢測FAM-FLIVO®體內Poly Caspase檢測試劑盒:

FLIVO®試劑盒提供了一種簡單、準確的方法來檢測體內caspase活性。類似于我們的FLICA®探針,但優化了整個活動物標記。為標記含有活性caspases的細胞,靜脈注射FLIVO并讓其循環約60分鐘。由于試劑是細胞本身的,當它在體內循環時,它很容易在遇到的所有細胞內擴散或擴散。如果細胞內存在活躍的caspase酶,FLIVO會與caspase活性位點形成不可逆共價鍵。如果細胞膜完好,結合的FLIVO探針將留在細胞內。任何未綁定的FLIVO將在大約一個小時內從動物的循環中移除。組織中剩余的綠色熒光信號是注射試劑時發生的半胱天冬酶活性的直接測量。一旦多余的FLIVO從動物體內清除,組織就可以進行分析了。無需進一步染色。組織可以通過窗腔系統或其他可接近的腔直接觀察。或者,目標組織可以被移除并進行分析。FLIVO非常敏感,會檢測到自然發生的背景細胞凋亡。凋亡細胞的caspase活性高于對照細胞,因此它們在FLIVO作用下熒光更亮。

 

二、艾美捷FLIVO探針活體凋亡檢測之FLIVO示蹤劑:

準備樣品和對照品。

45 mL diH201:10稀釋10X注射緩沖液。

50μL DMSO重組NIR-FLIVO 690示蹤劑。

450μL 1X注射緩沖液稀釋NIR-FLIVO 1:10

靜脈注射50μL

NIR-FLIVO循環4小時。

想象動物。NIR-FLIVO690示蹤劑在690nm激發,在709nm發射。

如果不直接查看,則切除組織并處理樣本以進行進一步分析。

可選:用其他染色劑(如Hoechst 33342或抗體)標記切除的樣品。

如果需要,修復切除的樣本。

用熒光顯微鏡或流式細胞儀分析切除的樣品。

 

以上,是有關于艾美捷FLIVO探針活體凋亡檢測的相關研究方案。


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