Ezh2是PR2/Eed-Ezh2復(fù)合體的催化子單位,它將組蛋白H3的LY9(H3K9ME)和LY27(H3K27ME)甲基化,從而導(dǎo)致受影響目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄抑制。能使組蛋白H3的單、二和三甲基化LY27分別形成H3K27M1、H3K27M2和H3K27M3。與含有Ezh2的復(fù)合物相比,它在胚胎干細(xì)胞中更為豐富,在形成H3K27me3方面起著重要作用,而H3K27me3是胚胎干細(xì)胞身份識(shí)別和適當(dāng)分化所必需的。PRC2/Eed-Ezh2復(fù)合體也可以作為DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的招募平臺(tái),從而將兩個(gè)表觀遺傳抑制系統(tǒng)聯(lián)系起來。受到PRC2/Eed-Ezh2復(fù)合體抑制的基因包括HXC8、Hoxa9、myt1、CDkn2A和視黃酸靶基因。EZH2也可以甲基化非組織蛋白,如轉(zhuǎn)錄因子GATA4。

EZH2 (Y641N) TR-FRET 檢測(cè)試劑盒旨在以均相 384 反應(yīng)形式測(cè)量突變 EZH2 復(fù)合物 [EZH2 (Y641N)/EED/SUZ12/RbAp48/AEBP] 的活性。這種基于 FRET 的檢測(cè)不需要耗時(shí)的清洗步驟，使其特別適合高通量篩選應(yīng)用。EZH2 (Y641N) 檢測(cè)試劑盒的關(guān)鍵是識(shí)別甲基化組蛋白 H3K27 的高度特異性抗體。使用該試劑盒，只需在微量滴定板上執(zhí)行三個(gè)簡(jiǎn)單步驟即可進(jìn)行甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)。首先，將腺苷甲硫氨酸與含有測(cè)定緩沖液和甲基轉(zhuǎn)移酶的樣品一起孵育 4 小時(shí)。接下來，添加甲基化 H3K27 的抗體。最后，添加染料標(biāo)記的受體，然后進(jìn)行熒光檢測(cè)。

艾美捷Ezh2(Y641N)微量金屬測(cè)定試劑盒：

英文名稱：EZH2 (Y641N) TR-FRET Assay Kit  

貨號(hào)：52078

同義詞：HTRF

檢測(cè)試劑盒形式：熒光共振能量轉(zhuǎn)移

提供方式：EZH2 (Y641N) TR-FRET 檢測(cè)試劑盒采用方便的形式，包含組蛋白 H3 肽底物、針對(duì)組蛋白 H3 甲基化 K27 殘基的 Tb 標(biāo)記抗體、S-腺苷甲硫氨酸、甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)緩沖液、TR-FRET 檢測(cè)緩沖液、染料-實(shí)驗(yàn)室。

僅供研究使用

所需但未提供的材料或儀器:

能夠測(cè)量時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (TR-FRET) 的熒光酶標(biāo)儀 可

調(diào)節(jié)微量移液器和無菌吸頭

該突變?cè)诳茖W(xué)文獻(xiàn)中經(jīng)常被引用為變體 3 中的 Y641N（GenBank 登錄號(hào) NM_001203247）

格式：

儲(chǔ)存與使用：

儲(chǔ)存/穩(wěn)定性：從收到之日起至少6個(gè)月按指示儲(chǔ)存.

運(yùn)輸溫度：-80℃，避免冷凍/解凍循環(huán)。

Ezh2(Y641N)微量金屬測(cè)定試劑盒文獻(xiàn)引用：

1. Dillon, S.C., et al. Genome Biology 2005; 6:227

2. Morin, R.D., et al. Nat Genet. 2010, 42(2):181