詳細介紹
1.產品名稱:大鼠椎間盤纖維環細胞
2.組織來源:椎間盤組織
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
大鼠椎間盤纖維環細胞分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成,位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環的前側及兩側較厚,而后側較薄。纖維環的前部有強大的前縱韌帶,后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環細胞密度為9000個細胞/mm3,其外層的細胞呈梭型,主要屬于纖維細胞,內層細胞呈圓形,主要屬于軟骨細胞。在培養的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現,它們的核較圓,核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網和滑面內質網。細胞質內線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少,纖維環的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。
本公司生產的采用膠原酶-中性蛋白酶聯合消化法并結合軟骨細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經Ⅰ型膠原蛋白、Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
DMEM-F12、FBS、軟骨細胞生長添加劑、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養基(產品貨號:CM-R200)作為體外培養的培養基。
T25瓶細胞處理方法
收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時。并進行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。
2.將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩定細胞狀態。
3.預熱培養基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4.顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
②若細胞密度較大,達到80%以上,將細胞傳代培養。
注:
培養瓶里的培養基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養基。由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基。(這里是針對原來*培養基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細胞后如細胞狀態不佳或培養中遇到問題,煩請當天盡快并提供圖片,以便售后處理。7天內反饋,細胞本身問題免費重發如人為原因導致可根據實際情況酌情處理;7天內未接到任何反饋視為合格,不予免費售后