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技術(shù)文章

揭秘ELISA顯色淡原因及解決方案

閱讀:218          發(fā)布時(shí)間:2023-7-3

ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)也就是酶聯(lián)免疫吸附測定,是指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結(jié)合,進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。下面揭秘ELISA顯色淡的八大原因及解決方案。

 原因一:試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長,溫度太高。

    解決方案:盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。

 原因二:試劑盒未充分平衡。

    解決方案:試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。

原因三:培養(yǎng)箱溫度不足37℃。

    解決方案:注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。

原因四:保溫時(shí)間不足。

    解決方案:校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)。

 原因五:洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增加。

    解決方案:按說明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)。

 原因六:移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔。

    解決方案:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用。

 原因七:蒸餾水水質(zhì)有問題。

    解決方案:使用新鮮合格的蒸餾。

 原因八:底物作用時(shí)間不足。

    解決方案:準(zhǔn)確定時(shí)。    

顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說,顯色時(shí)間過短,結(jié)果偏低;顯色時(shí)間過長,空白增高或者非特異性顯色增加。我公司供應(yīng)的ELISA試劑盒種屬有人、大鼠、小鼠、豬、雞、兔、猴、牛、植物……



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