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技術文章

從不同方面比較原代細胞和傳代細胞培養

閱讀:357          發布時間:2024-5-13

    原代細胞生長緩慢,一般認為,原代細胞培養的第1代和傳代到第10代以內統稱為原代培養。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去,這些存活的細胞一般能夠傳到40-50代,這種傳代細胞叫做細胞株。當細胞傳至50代以后又會出現“危機",這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點,從而可能無限制地傳代下去,這種傳代細胞稱為細胞系。


一、定義方面:

1、原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的第1次培養,也叫初代培養。

 

2、傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。

 

二、特點方面

1、原代細胞培養與體內原組織在形態結構和功能活動上相似性大。由于培養的細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。同時也為以后傳代培養創造條件。

 

2、當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。

 

三、生存率方面

1、原代細胞培養過程相對復雜,培養條件要求也更高。 

2、傳代細胞培養一般普通培養條件下都容易生存,傳代細胞容易增殖。

 

四、原理方面

原代細胞培養:將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。

 

傳代細胞培養:當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行,每一步都需要認真仔細的無菌操作。

 


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