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Pim-2原癌基因（PIM2）檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
閱讀：204 發(fā)布時(shí)間：2020-1-6| 提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 6KB |
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Pim-2原癌基因(PIM2)檢測試劑盒本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中 25 羥基維生素 D3（25(OH)D3）含
量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中Pim-2原癌基因(PIM2)水平。用純化的Pim-2原癌基因(PIM2)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加Pim-2原癌基因(PIM2)，再與 HRP 標(biāo)記的 Pim-2原癌基因(PIM2)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Pim-2原癌基因(PIM2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中Pim-2原癌基因(PIM2)濃度。
Pim-2原癌基因(PIM2)檢測試劑盒抗原修復(fù)方法
常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01M pH6.0）、EDTA 抗原修復(fù)液（pH8.0 或
9.0）等等。
一、酶消化修復(fù)法
切片脫蠟水化處理，TBS 沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育
20~30min 后 TBS 沖洗即可。
二、微波抗原修復(fù)法
微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料
切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或高檔繼續(xù)微波 10~15min，取出微波
盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，
須自行調(diào)整。
三、直接高壓抗原修復(fù)法
取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)
液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí) 1.5~2.5min 即可脫離熱源，自
然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。
四、隔水式高壓抗原修復(fù)法
不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸
騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)
4~8 min 即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用
于較難檢測或核抗原的修復(fù)。