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在前期的推送中，我們分享了高內(nèi)涵技術(shù)主導(dǎo)的Pharmacoscopy（PCY）Ex vivo篩選技術(shù)平臺在血液瘤精準(zhǔn)醫(yī)療的成功，和實(shí)體瘤、細(xì)胞治療等重要領(lǐng)域的應(yīng)用前沿。不出意外，開辟腫瘤之外的新戰(zhàn)場成了PCY技術(shù)的重要突破點(diǎn)。在此，我們分享PCY技術(shù)以類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）為切入點(diǎn)，在自免領(lǐng)域功能性精準(zhǔn)醫(yī)療的創(chuàng)新研究。相關(guān)的研究成果發(fā)表于柳葉刀旗下的eBioMedicine上。有意思的是，PCY技術(shù)在血液瘤的突破案例同樣也發(fā)表于柳葉刀旗下的lancet haematology。
與直觀的差異化腫瘤殺傷表型不同（下面第一個(gè)流程），RA的自免相關(guān)細(xì)胞表型會更為復(fù)雜。對此，研究進(jìn)一步發(fā)揮細(xì)胞影像的內(nèi)涵優(yōu)勢，靶向RA發(fā)病相關(guān)、臨床易獲得的PBMC細(xì)胞群體，結(jié)合臨床RA藥物和陽性對照化合物，構(gòu)建PCY功能性篩選流程（下面第二個(gè)流程）。
在直接分析各種免疫細(xì)胞群體豐度（下圖左）的基礎(chǔ)上，研究進(jìn)一步開發(fā)高內(nèi)涵技術(shù)平臺，量化細(xì)胞的形態(tài)（下圖中）和相互作用表型（下圖右）。
在上述的PCY技術(shù)路線上，我們就可以直觀地檢測ex vivo藥物刺激對于PBMC不同細(xì)胞群體的表型影響（下圖左），并進(jìn)一步分析量化形態(tài)學(xué)（如下圖中）和重要的細(xì)胞間相互作用表型（下圖右）的變化。同時(shí)，研究也證明該技術(shù)路線還可支持活細(xì)胞體系，拓展了PCY技術(shù)的應(yīng)用場景。
在此基礎(chǔ)上，研究在ex vivo水平篩選和分析RA藥物和免疫細(xì)胞表型的相關(guān)性。開展聚類研究的同時(shí)，研究挖掘和發(fā)現(xiàn)新的藥物作用表型，如Etanercept對Monocyte的表型影響。與健康對照組相比，研究也進(jìn)一步探究RA患者體內(nèi)藥物治療（In vivo treatment）對PBMCs復(fù)雜表型的影響。
最后，回歸到自免精準(zhǔn)醫(yī)療的主題，研究利用PCY技術(shù)來區(qū)分健康對照組和不同發(fā)病程度的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）患者（下圖左）和潛在生物標(biāo)志物挖掘。有意思的是，PBMC群體中，T細(xì)胞對陽性刺激藥物，而不是RA藥物處理的形態(tài)學(xué)反應(yīng)，有能效指示疾病的發(fā)生和程度（下圖中、右）。這一發(fā)現(xiàn)很可能是自免情況下，持續(xù)的差異化細(xì)胞激活所致。
與之前的PCY篩選研究一致，Opera Phenix高內(nèi)涵平臺結(jié)合CellCarrier成像微孔板依然主導(dǎo)核心的PCY篩選流程。此外，JANUS移液工作站則參與了自動化免疫熒光染色工作。通過優(yōu)化液體處理參數(shù)，JANUS液體處理工作站可用于復(fù)雜細(xì)胞模型細(xì)胞影像篩選中，如模型培養(yǎng)、藥物處理和染色等多個(gè)流程的自動化工作（如下流程圖）。自動化移液技術(shù)的引入可顯著提高細(xì)胞影像篩選的可重復(fù)性和規(guī)模化能力，同時(shí)減少了人為操作導(dǎo)致的誤差和對珍貴細(xì)胞模型的破壞風(fēng)險(xiǎn)。
JANUS移液工作站
Opera Phenix™ PLUS高內(nèi)涵篩選系統(tǒng)
