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賽默飛311培養箱內細胞生長不好是什么原因？

時間：2025/7/23閱讀：129

賽默飛311培養箱內細胞生長不良可能由多種因素引起，包括培養環境、細胞狀態、操作規范及污染問題等。以下是可能的原因及對應的解決方案：

一、培養環境問題

1、溫度波動

培養箱溫度不穩定（如開門頻繁、校準失效或風扇損壞）會影響細胞生長。賽默飛311培養箱雖采用水套式保溫設計，但頻繁開關門仍可能導致溫度波動。

解決方案：定期校準溫度傳感器，減少開門時間，確保風扇正常運轉。

2、CO?濃度異常

CO?濃度偏離5%會影響培養基pH值，進而抑制細胞生長。CO?傳感器（如T/C或IR型）可能出現校準偏差。

解決方案：檢查CO?控制器，使用預標定的培養基監測pH，必要時重新校準傳感器。

3、濕度不足

濕度過低會導致培養基蒸發，滲透壓升高，影響細胞代謝。

解決方案：確保增濕盤（3.0L標準容量）中有足夠水分，并定期檢查蒸發率。

二、污染問題

1、微生物污染（細菌、真菌、支原體）

支原體污染不易察覺，但會導致細胞生長緩慢或形態異常。

解決方案：

2、定期檢測支原體污染（如PCR或熒光染色）。

若發現污染，清潔培養箱，更換HEPA過濾器（建議每6-12個月更換）。

避免長期使用抗生素，以防掩蓋污染。

HEPA過濾器失效

賽默飛311培養箱的HEPA過濾器可維持Class 100潔凈環境，但長期使用后過濾效率可能下降

解決方案：按提示更換過濾器，并結合高溫滅菌（如140℃ Steri-Cycle）殺滅殘留微生物。

三、細胞操作問題

1、傳代不當

消化過度或不足：胰酶作用時間過長會損傷細胞，而消化不足會導致細胞團形成。

接種密度過低：細胞間接觸抑制不足，增殖緩慢。

解決方案：優化消化時間，按推薦密度接種（如HEK293傳代比例1:3-1:6）。

2、凍存/復蘇損傷

凍存液配方不當（如DMSO濃度錯誤）或復蘇速度過慢可能導致細胞死亡。

解決方案：使用含10% DMSO的凍存液，復蘇時37℃水浴快速融化。

四、設備維護問題

1、培養箱清潔不足

長期未清潔可能導致微生物滋生，尤其是不銹鋼內壁的角落。

解決方案：定期拆卸清洗內門襯墊、擱板，并使用70%乙醇或專業消毒劑擦拭。

2、傳感器故障

溫度、CO2或O2傳感器損壞可能導致環境參數失控

解決方案：聯系售后進行校準或更換。。

五、總結建議

若細胞生長不良，建議按以下步驟排查：

1、檢查培養箱參數（溫度、CO2濕度）是否穩定。

2、檢測污染（尤其是支原體）。

3、優化細胞操作（傳代、凍存）。

4、更換新鮮培養基/血清。

5、維護設備（清潔、更換HEPA過濾器）。

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