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紫外可見分光分度計吸光度范圍及誤差影響
紫外可見分光分度計具有靈敏度高、操作簡便、快速等優(yōu)點，是生物化學實驗中常用的實驗方法。許多物質的測定都采用分光光度法。在分光光度計中，將不同波長的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收強度。
紫外可見分光分度計的吸光度范圍應該是在0.3-0.7之間，一般在0.2-0.8的范圍里準確。在分析過程中，很多人都是做一條標準曲線，然后去測定樣品，很少有人關心誤差方面的問題。
在分光分析中，化學條件引起的誤差比較大，有關吸光度測量的誤差，很多人都從書上看的，認為吸光度在0.2-0.8之間誤差小，在0.434處最小，但不是特清楚理論根據(jù)。還有一個問題，如果吸光度在2.0，難道我們就去稀釋樣品，讓其吸光度在0.2-0.8的范圍內嗎？反之，如果吸光度在0.02，那我們是不是要濃縮樣品呢？
對此有兩種不同的看法：
1.如果吸光度不在0.2-0.8之間，我們要去稀釋或濃縮樣品來進行測量；
2.如果吸光度不在0.2-0.8之間，直接進行測量，因為稀釋或濃縮樣品產生的誤差遠遠大于直接測量吸光度產生的誤差。
在分光光度計中，透射比的標尺是均勻的。吸光度與透射比為負對數(shù)關系，所以吸光度的標尺刻度是不均勻的。因此，對于同一臺儀器，讀數(shù)的波動對透射比來說，應基本為一定值;而對吸光度來說，它的讀數(shù)則不在為定值。由分光光度計讀數(shù)標尺上吸光度與透射比的關系可以看出，吸光度越大，讀數(shù)波動所引起的吸光度誤差也越大。