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瑞典SVEA色譜柱在色譜操作過程中需要注意哪些問題
閱讀：866 發布時間：2019-11-19
瑞典SVEA色譜柱在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。
1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
2、應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變為全部是水，反之亦然，流動相使用前必須經脫氣和過濾處理。
3、一般說來色譜柱不能反沖，只有生產者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。
4、選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質被溶解，壓力升高是需要更換預柱的信號。
5、避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。
6、經常用強溶劑沖洗瑞典SVEA色譜柱，清除保留在柱內的雜質。在進行清洗時，對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規分析需要50～75ml。
7、避免使用高粘度的溶劑作為流動相；如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應在實驗完畢柱子沖洗干凈。
8、進樣樣品要提純；
9、嚴格控制進樣量，不要超載。
10、每天分析測定結束后，都要用適當的溶劑來清洗柱，用洗脫能力強的洗脫液沖洗，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當采用鹽緩沖溶液作流動相時，使用完后應用無鹽流動相沖洗。含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道，不宜長期與之接觸。裝在HPLC儀上柱子如不經常使用，應每隔4~5天開機沖洗15分鐘。
11、大多數瑞典SVEA色譜柱的pH穩定范圍是2－7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍。
12、按說明書保存色譜柱，禁止將緩沖液留在柱內過夜，注意反相柱不能用純水長時間沖。
13、不建議拆開柱子，自己更換填料。