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色譜柱填料方法有哪些呢,想知道的一起來(lái)看看吧

閱讀:4469      發(fā)布時(shí)間:2021-8-9
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   色譜柱填料技術(shù)呈現(xiàn)二大趨勢(shì)。一個(gè)趨勢(shì)是快速液相,利用亞 2?m小粒徑硅膠、核殼型硅膠;第二大趨勢(shì)是越來(lái)越豐富的選擇性。填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù),即柱效和背壓。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3μm的填料應(yīng)用,在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是位一的因素。
  如果固定相選擇是真確,但是分離度不夠,那么選擇更小粒度的填料是很用有的,3μm填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而,3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時(shí),柱效提高意味著在相同條件下可以選擇更短的色譜柱,以縮短分析時(shí)間,另外,可以采用低粘度的溶劑做流動(dòng)相或增加色譜柱的使用溫度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色譜柱的壓力。
  色譜柱填料方法有下面這些:
  a、反相(與離子對(duì))方法
  C18(十八烷基或ODS)-----------普適性好;保留性強(qiáng),用途廣
  C8(辛基)-----------與C18相似,但保留值稍小
  C3,C4-----------保留值小;大多用于肽類與蛋白質(zhì)
  C1【三加基硅烷(TMS)】------保留值小;不穩(wěn)定
  苯基,苯乙基-----------保留值適中;選擇性有所不同
  CN(氰基)-----------保留值適中;正相和反相均可使用
  NH2(氨基)-----------保留性弱;用于烴類;欠穩(wěn)定
  聚苯乙烯基b-----------在1<PH<13的流動(dòng)相中穩(wěn)定;對(duì)某些分離峰形好,柱子壽命長(zhǎng)
  b、正相方法
  CN(氰基)-----------普適性好;極性適中;用途廣
  OH(二醇基)-----------極性大于CN
  NH2(氨基)-----------極性大,欠穩(wěn)定
  硅膠b------------普適性好;價(jià)廉;操作欠方便;用于制備LC
  c、空間排阻方法
  硅膠b-----------普適性很好;作吸附劑用
  硅烷化硅膠-----------吸附性弱,溶劑兼容性好;適用于有機(jī)溶劑
  OH(二醇基)------------欠穩(wěn)定;在水SEC中使用(凝膠過(guò)濾)
  聚苯乙烯基b------------廣泛用于有機(jī)SEC(凝膠滲透);一般與水和極性大的有機(jī)溶劑不相容
  d、離子交換方法
  鍵合相------------穩(wěn)定性與重現(xiàn)性均不好
  聚苯乙烯基b-------------柱效不高;穩(wěn)定;重現(xiàn)性好
  好了,以上便是關(guān)于色譜柱填料的相關(guān)內(nèi)容介紹了。

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