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山東百歐醫療科技有限公司

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大容量低速冷凍離心機的實際運用分享

閱讀:1857      發布時間:2021-9-15
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  大容量低速冷凍離心機結構簡單、安裝方便、操作容易,能保持產品的晶粒形狀,采用彈性支撐結構,能減少由于不均勻負載引起的振動,其運轉平穩。能實現密封,避免對物料的污染。
  下面咱們來了解下采用大容量低速冷凍離心機提染色體DNA,可直接應用于常規的分子生物學實驗,包括PCR、限制性內切酶的切割,以及基因組文庫的構建的實際應用:
  1、取1ml過夜培養菌液于8000g,離心機離心2min。去除培養基后,用400ulSTE緩沖液(100mMNaCl,10mMTris/HCl,1mMEDTA,pH8.0)重懸菌體,按相同條件離心清洗菌體兩次。
  2、收集的菌體用200ulTE緩沖液(10mMTris/HCl,1mMEDTA,pH8.0)懸起后加約50mg直徑425-600um規格的玻璃珠,再加入100ulTirs飽和苯酚。
  3、上述混合液在漩渦振蕩器上振蕩(細菌,振蕩60s;酵母,振蕩120s-200s),隨后于4℃,13000g,離心5min。
  4、吸取上層水相(約160ul)轉移至一個新的離心管中,加TE緩沖液補至200ul,再加入100ul氯仿混勻后,于4℃,13000g,離心5min。重復此步兩到三次。
  5、轉移上層水相(約160ul)至一個新的離心管中,補加40ulTE和5ulRNase(10mg/ml),37℃消化10min。
  6、加入100ul氯仿混勻于4℃,13000g,離心5min。
  7、轉移上層水相(約150ul)至一個新的離心管中。
  8、至此,上層水相即含有純化好的基因組DNA,可直接用于隨后的常規分子生物學實驗。
  希望上述內容能夠幫助大家更好的了解本產品。

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