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DNA合成儀的結(jié)構(gòu)和性能
一、用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法，每次將一個核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上，加入每一個核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學(xué)反應(yīng)和操作細節(jié)隨不同的儀器而改變，廣泛應(yīng)用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
二、原理組成：
(1)DNA合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮氣及電磁閥組驅(qū)動液體試劑，也可采用氦氣驅(qū)動試劑。某些合成儀采用sliderblock滑塊系統(tǒng)及精密蠕動泵，可不采用氣體為驅(qū)動系統(tǒng)。采用氣體及電磁閥驅(qū)動液體試劑時，需首先將管路系統(tǒng)電磁閥前段，含試劑瓶組中壓力加壓到規(guī)定氣壓，通過合成管理軟件或手動打開電磁閥(一般打開時間為數(shù)ms)，即可驅(qū)動液體試劑到所需的合成柱中。
(2)試劑輸送系統(tǒng)包括兩個試劑閥塊(8堿基儀器有3個)及2個或4個柱閥塊。閥塊控制氣體和化學(xué)試劑流入柱子及出口。除亞磷酰胺和四唑以外，試劑和溶劑都被同時輸送到所有活化柱。當有多個活化柱時，對流速的細微變化，以自動調(diào)節(jié)每個柱子的輸送次數(shù)來補償。每一個5—端口柱閥塊將流出物導(dǎo)入廢液口、DMT收集口，或DNA收集瓶，它也控制用于除去或沖洗柱內(nèi)和柱閥塊內(nèi)的試劑的氬氣。
(3)試劑通過底部的luer接頭，流到柱子，如果沒擰上下面的一個luer接頭，應(yīng)會在一個圓柱形的玻璃流路節(jié)流閥上發(fā)現(xiàn)。試劑通過流路節(jié)流閥中一個很小的通道流到柱子。小量的試劑可以在流路節(jié)流閥中結(jié)晶，長期這樣會造成流路阻塞。