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 相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標序列和內參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內
  1、用內參基因的CT值歸一目標基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計算表達水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達量的比值


參數規格：

產品名稱：沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒規格
英文名稱：Haplosporidium costalePCR
貨號：YS30850-R
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

使用方法:

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

具有下列特點：
1.根據 指標的保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
2.靈敏度比常規 PCR 高 2-3 個數量級，可以達到幾百拷貝/反應。
3.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單，定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6.本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。

Bub1 antibody原裝、分裝異維A

Lactate Dehydrogenase Isoenzyme V antibody原裝、分裝異維A（標準品）

Lambda Light chain antibody原裝、分裝美羅培南

Cytokeratin 4 antibody [6B10]原裝、分裝美羅培南

Cytokeratin 5 + 8 antibody [RCK102]原裝、分裝美羅培南

Lambda Light chain antibody (FITC)原裝、分裝美羅培南(標準品)

Lambda Light chain antibody (HRP)原裝、分裝卡那

Prealbumin antibody原裝、分裝卡那

NCAM1 antibody [RNL-1]原裝、分裝卡那CBL (phospho Y731) antibody [EP973Y]原裝、分裝2'-氧基腺;2'-O-基腺苷

CBL (phospho Y731) antibody [EP973Y]原裝、分裝2'-氧基腺;2'-O-基腺苷

CBL (phospho Y731) antibody [EP973Y]原裝、分裝D-纈氨

FOXO1A antibody [EP927Y]原裝、分裝D-纈氨

FOXO1A antibody [EP927Y]原裝、分裝2'-脫氧鳥苷-3'-單二鈉

FOXO1A antibody [EP927Y]原裝、分裝2'-脫氧鳥苷-3'-單二鈉

Cardiac Troponin I antibody [EP1106Y]原裝、分裝D-α-氨基己二

Cardiac Troponin I antibody [EP1106Y]原裝、分裝D-α-氨基己二

Cardiac Troponin I antibody [EP1106Y]原裝、分裝D-α-氨基己二
沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒規格RPA32/RPA2 antibody原裝、分裝9H,9H-三十氟-8,10-十七二(>98.0%(GC))

ORC6L antibody原裝、分裝9-溴菲(>98.0%(GC))

NCM antibody原裝、分裝3-溴菲(>98.0%(GC))

CCDC21 antibody原裝、分裝3,6-二基菲(>95.0%(GC))

NPRL2 antibody原裝、分裝3-基菲(>98.0%(GC))

IPO5 antibody原裝、分裝9-菲硼 (含有數量不等的酐)

GPR56 antibody原裝、分裝9-菲硼 (含有數量不等的酐)

NHLRC2 antibody原裝、分裝3-溴-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(HPLC)(T))

BNIP3 antibody [ANa40]原裝、分裝5-氯-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))

注意事項：
1. 建議使用新鮮采取的動物組織，若為長期冷凍組織，應盡量避免反復凍融，否則會導致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間，也可在37℃水浴中預熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測時，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時會在泳道中出現一大團拖尾亮帶，影響實驗結果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內，以便擴增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。