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產(chǎn)品簡介
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，*進(jìn)口來源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。的凍存是細(xì)胞培養(yǎng)的基本操作，不同的實驗室采用的方法略有差異，但是都會遵循慢凍速溶的宗旨。
詳細(xì)介紹
購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購產(chǎn)品、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。點擊了解更多克隆感受態(tài)細(xì)胞。
| 產(chǎn)品名稱 | DH5α 感受態(tài)細(xì)胞 |
| 規(guī)格 | 100ul*20/100ul*100 |
| 貨號 | YSRIBIO9631 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
ABCG1 英文名稱： 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體 0.1ml
Adiponectin receptor 2 英文名稱： 脂聯(lián)素受體2抗體 0.1ml
ANGEL1 英文名稱： ANGEL1蛋白抗體 0.2ml
ANGEL2 英文名稱： ANGEL2蛋白抗體 0.2ml
ANKLE2 英文名稱： ANKLE2蛋白抗體 0.2ml
ANKMY1 英文名稱： 特異性錨樣蛋白1抗體 0.2ml
ANKRD13B 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體 0.2ml
ANKRD20A1 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體 0.2ml
ANKRD20A3 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體 0.2ml
ANKRD22 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體 0.2ml
ANKRD50 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體 0.2ml
ATP6V1G2 英文名稱： 氫離子轉(zhuǎn)運ATP合成酶6G抗體 0.1ml
ANKRD26 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體 0.2ml
ANKRD26 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體 0.2ml
ACY3 英文名稱： 丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體 0.2ml
ARSK 英文名稱： 芳香基硫酸酯酶K抗體 0.2ml
Amphiphysin 英文名稱： 神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體 0.2ml
Ankyrin G 英文名稱： 錨定蛋白G抗體 0.2ml
Actin 英文名稱： 肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體 0.1ml
ADAMTS1 英文名稱： 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體 0.1ml
ADAMTS7(NT) 英文名稱： 整合素樣金屬蛋白酶與
DH5αλpir 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100 克隆感受態(tài)細(xì)胞
DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*5 克隆感受態(tài)細(xì)胞
DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20 克隆感受態(tài)細(xì)胞
*0 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20 克隆感受態(tài)細(xì)胞
*0 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100 克隆感受態(tài)細(xì)胞
*0 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*5 克隆感受態(tài)細(xì)胞
*0 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20 克隆感受態(tài)細(xì)胞
*0F`感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 克隆感受態(tài)細(xì)胞
*0F`感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 克隆感受態(tài)細(xì)胞
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20 克隆感受態(tài)細(xì)胞
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100 克隆感受態(tài)細(xì)胞
JM109 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20 克隆感受態(tài)細(xì)胞
JM109 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100 克隆感受態(tài)細(xì)胞
JM110 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 克隆感受態(tài)細(xì)胞
JM110 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL1-Blue 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*5 克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL1-Blue 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20 克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL1-Blue MRF`Kan 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 克隆感受態(tài)細(xì)胞
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞XL1-Blue MRF`Kan 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL2-Blue 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL2-Blue 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL10-Gold 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 克隆感受態(tài)細(xì)胞
凝血酶1型-7抗體 (N端抗體) 0.1ml
ADAMTS7 英文名稱： 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體 0.1ml
beta Adducin 英文名稱： 內(nèi)收蛋白抗體 0.1ml
ADFP 英文名稱： 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
操作方法：
1. 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少13 h。
基本共性:
1、所有的細(xì)胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)及糖被構(gòu)成的生物膜，即細(xì)胞膜。
2、所有的細(xì)胞都含有兩種核酸：即DNA與RNA。
3、作為遺傳信息復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的載體。
4、作為蛋白質(zhì)合成的機器—核糖體，毫無例外地存在于一切細(xì)胞內(nèi)，核糖體，是蛋白質(zhì)合成的機器，在細(xì)胞遺傳信息流的傳遞中起重要作用。
5、所有細(xì)胞的增殖都以一分為二的方式進(jìn)行分裂。
6、能進(jìn)行自我增殖和遺傳
7、新陳代謝
8、細(xì)胞都具有運動性，包括細(xì)胞自身的運動和細(xì)胞內(nèi)部的物質(zhì)運動
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。