詳細介紹
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2)根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
產品名稱 | PON elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human paraoxonase, PON Elisa Kit |
規格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節省實驗經費。
利福布(標準品)質量規格:HPLC>95%,標準品Rifabutin大鼠支氣管上皮細胞*培養基100mL
噻(標準品)質量規格:供HPLC法系統適用性試驗用Chlorothiazide釀酒酵母Saccharomycescerevisiae鏈霉菌Streptomycessp.
通關藤苷H;Tenacissoside訂購|咨詢規格:20mg化整合素β4抗體OPELISAKit阿片肽(OP)ELISA試盒
角鯊訂購|咨詢規格:0.5ml/支DNA聚合酶ι/DNApolι抗體PDCD5ELISAKit細胞程序性死亡蛋白5(PDCD5)ELISA試盒
化矢素;CyanidinChlo訂購|咨詢規格:10mg大鼠β細胞素(βTC)ELISA試盒,英文名:βTCELISAKit
新藤黃;neogambogicaci訂購|咨詢規格:20mg人S100鈣結合蛋白A7(S100A7)ELISA試盒人96T0.312-20ng/mL大鼠能受體β3(ADRβ3)ELISA試盒,英文名:ADRβ3ELISAKit
四生物蝶呤;沙蝶呤;(6R)-BH4質量規格:>99%Tetrahydro-L-Biopterin(dihydrochloride)半糖凝集素9B(GAL9B)重組蛋白RecombinantGalectin9B(GAL9B)
6-巰基嘌呤質量規格:國進口6-Mercaptopurine克氏雙糖鐵瓊脂/KilglerIronAgar細菌復合生試驗250克國產/進口
DL-氨酯鹽鹽質量規格:0.98DL-Alaninemethylesterhydrochloride釀酒酵母Saccharomycescerevisiae熱帶假絲酵母Candidatropicalis
氨基三Aminothree aceticacid保存:-20℃規格:50mg腺苷單活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體
漏蘆(祁州漏蘆)訂購|咨詢規格:1g4號染色體開放閱讀框33抗體TLOC1ELISAKit易位蛋白1(TLOC1)ELISA試盒
吲帕訂購|咨詢規格:ELISAKitforHumanTumorproteinD52大鼠巨噬細胞來源趨化因子(MDC)ELISA試盒,英文名:MDCELISAKit
酯規格:HPLC≥98%;20mg訂購|咨詢人α-生育酚轉移蛋白(Alpha-TTP)ELISA試盒人96T0.156-10ng/mL大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP3α)ELISA試盒,英文名:MIP3αELISAKit
氨基葡萄糖;Glucosamine規格:20mg訂購|咨詢COS-1(非洲綠猴SV40轉的腎細胞)5×106cells/瓶×2
PON elisa試劑盒UBE2J1SPOCK2XIAP相關因子1凋亡抑制蛋白抗體
UQCRC1SRPX2羊抗人纖維蛋白原抗體
UHRF1Semaphorin 3DFas活化激酶結構域蛋白5抗體
UBE2V1Septin 11F-box蛋白38抗體
CEAPOP1人酰膽(ACH)免疫試盒
CEAASB5人脫酶18家族成員A1(ALDH18A1)免疫試盒
CDONABP1人脫酶(ALDH)免疫試盒
CD59phospho-ATF2 (Thr55)人基二免疫試盒
Cyclin EADRA1B人肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)免疫試盒
C7ORF50Bcl-2 alpha人脫酶(ADH)免疫試盒
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。