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P9004-pBARGPE1-Kan蛋白表達質粒
  • P9004-pBARGPE1-Kan蛋白表達質粒
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更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pBARGPE1-Kan蛋白表達質粒
啟動子gpdA
復制子pUC
終止子trpC
質粒分類其他宿主載體;絲狀真菌表達質粒
原核抗性Kan
真核抗性Bar
克隆菌株DH5α
培養條件37℃
表達宿主絲狀真菌
培養條件參考相關文獻
誘導方式無需誘導
5'測序引物根據全序列設計
3'測序引物根據全序列設計
質粒宿主絲狀真菌
質粒用途蛋白表達
片段類型基因CDS

 

注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

442℃熱激90s,再冰浴2min;

5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min;

6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒

 

pBARGPE1-Hygro-EGFP蛋白表達質粒
pBARGPE1-EGFP蛋白表達質粒
pBARGPE1-mCherry蛋白表達質粒
pBARGPE1-Hygro蛋白表達質粒
pBARGPE1-Kan蛋白表達質粒
pBARGPE1蛋白表達質粒
pAN8-1-gpdA蛋白表達質粒

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