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Tet-pLKO-Puro基因沉默,誘導(dǎo)質(zhì)粒
別名Plasmid #21915;PLKO-TET-On;四環(huán)素誘導(dǎo)
啟動子H1-2O2
復(fù)制子pUC ori,f1 ori,SV40 ori
終止子SV40 poly（A） signal
質(zhì)粒分類哺乳細(xì)胞，四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)載體
質(zhì)粒大小10633bp
原核抗性Amp
真核抗性Puro
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37℃

一、載體構(gòu)建的基本實驗步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備；
(2)目的DNA片段和載體的連接；
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化；
(4)克隆篩選。
(5)測序驗證及結(jié)果交付

二、詳細(xì)內(nèi)容
1、以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建，如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動物表達(dá)載體；報告基因載體等；
2、基因定點突變，包括單點突變，多點突變，基因缺失等；
3、載體元件替換和改造；
4、siRNA載體和miRNA表達(dá)載體構(gòu)建；
5、過表達(dá)載體構(gòu)建。

pLKO-p53-shRNA-941基因沉默質(zhì)粒

pLKO-p53-shRNA-427基因沉默質(zhì)粒

pLentiCRISPRV2-PTHLH(human)-sgRNA2基因編輯質(zhì)粒

pBABE-CDK4(human)-P2A-CCND1(human)-SV40-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒

pLVshRNA-U6-CCNDBP1(human)-shRNA1-PGK-EGFP(2A)Puro基因沉默質(zhì)粒

pLVshRNA-U6-IQGAP1(mouse)-shRNA3-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLVshRNA-U6-RAB11FIP2(mouse)-shRNA2-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLVshRNA-U6-IQGAP1(mouse)-shRNA2-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLVshRNA-U6-RAB11FIP2(mouse)-shRNA1-PGK-EGFP-E2A-Pur基因沉默質(zhì)粒

pLVshRNA-U6-EDAR(human)-shRNA5-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒

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