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P9003-pBARGPE1 蛋白表達質粒
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更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pBARGPE1 蛋白表達質粒
pBARGPE1蛋白表達質粒啟動子gpdA復制子pUC終止子trpC terminator質粒分類絲狀真菌過表達載體質粒大小5518bp質粒標簽無原核抗性Amp篩選標記Bar克隆菌株DH5α培養條件37℃表達宿主絲狀真菌誘導方式無需誘導5'測序引物根據全序列設計3'測序引物根據全序列設計質粒宿主絲狀真菌質粒用途蛋白表達


pBARGPE1 蛋白表達質粒

注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。


1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

442℃熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min

66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒


pBARGPE1-Hygro-EGFP蛋白表達質粒
pBARGPE1-EGFP蛋白表達質粒
pBARGPE1-mCherry蛋白表達質粒
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pBARGPE1-Kan蛋白表達質粒
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