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P67994-pgtshβ(fish)-AVPR2(human)-T2A-EGFP
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地: 上海

更新時間:2025-05-19 22:42:51

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名稱 pgtshβ(fish)-AVPR2(human)-T2A-EGFP
別稱 NM_000054.7;ADHR; DI1; DIR; DIR3; NDI; NDI1; V2R
質粒宿主 哺乳細胞
質粒用途 蛋白表達,轉座

名稱pgtshβ(fish)-AVPR2(human)-T2A-EGFP
別稱NM_000054.7;ADHR; DI1; DIR; DIR3; NDI; NDI1; V2R
基因長1113bp
質粒宿主哺乳細胞
質粒用途蛋白表達,轉座
片段類型ORF
片段物種
原核抗性Kan
篩選標記Neo/G418
熒光標記綠色
啟動子ZBactin
復制子pUC
感受態Stbl3
溫度37度
背景載體pTol2-Promoter-T2A-EGFP
正向引物PEGFP-N-3


注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。


1
、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

2
、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3
、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

4
42熱激90s,再冰浴2min

5
、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min

6
6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7
、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8
、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h

9
、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒



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