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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

PriCells: 正常兔食管上皮細胞培養(yǎng)

時間:2021-9-28 閱讀:234
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PriCells: 正常兔食管上皮細胞培養(yǎng)
 
實驗材料:
1. 大兔的正常食管組織
2. 6孔培養(yǎng)板:用多聚賴氨酸4℃包被過夜
3. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.4
4. 手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷
 
實驗方法:
1. 處死大兔,取正常食管組織放入含雙抗的PBS(pH=7.2)中反復(fù)清洗3次,以洗去組織表面的血絲及粘液;
2. 小心的用眼科剪鑷將食管黏膜與黏膜下組織分離;
3. 分離出的粘膜組織用含雙抗的PBS(pH=7.2)反復(fù)沖洗若干次;
4. 將清洗后食管黏膜組織剪成1mm3左右大小的組織塊;
5. 再次用含雙抗的PBS(pH=7.2)反復(fù)清洗,直至清洗液清亮為止;
6. 將黏膜組織塊按1塊/cm2的密度接種于6孔培養(yǎng)板中,上皮面朝下;
7. 將貼滿組織塊的培養(yǎng)板室溫放置5~10分鐘,待組織塊貼壁后,轉(zhuǎn)入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
8. 靜置2h左右,待組織塊基本不會浮起后,加入0.5-1ml培養(yǎng)液,置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。3-4天后有上皮細胞從組織邊緣爬出,7天左右鋪滿板面。
 
PriCells提供:
1. 各種原代細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基;
2. 各種原代細胞培養(yǎng)特制添加劑;
3. 原代細胞分離試劑盒;
4. 原代細胞鑒定試劑盒;
5. 各種原代細胞DNA;
6. 各種原代細胞RNA;
7. 各種原代細胞蛋白質(zhì);


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