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武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

PriCells: 臍血MSCs的分離

時間:2021-11-1 閱讀:246
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PriCells: 臍血MSCs的分離                                                                                          


試劑和材料: 
1. 培養基;
2. 0.05%胰蛋白酶,含EDTA;
3. PBSA;
4. T25;


實驗方法:
1. 為了獲得新鮮制備的CB-MNCs,按密度梯度分離法分離單個核細胞(MNCs);
2. 用培養基重懸新鮮分離或凍存的MNCs。凍存的MNCs在鋪板前要37℃迅速復蘇并用培養基洗一遍;
3. 將重懸在培養基的CB-MNCs接種到T25的培養瓶,接種密度為3×105 個細胞/cm2
4. 將細胞放入37℃ 5%CO2的培養箱中;
5. 每7天更換一次培養基,直到貼壁生長的成纖維細胞樣的細胞達到匯合;
6. 一旦達到匯合,用0.05%胰蛋白酶/EDTA處理5min,重懸細胞,然后將細胞按1×105 個/瓶重新接種;
7. 達到細胞匯合后,用培養基按1:5稀釋后再接種培養;

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