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人軟骨細胞特點和傳代步驟
人軟骨細胞特點和傳代步驟
人軟骨細胞，外文名chondrocyte，是軟骨細胞因在軟骨組織中的存在部位不同，其形態亦異。
人軟骨細胞特點：
人軟骨細胞（Chondrocyte）; 幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層，單個分布，體積較小，呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形，染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2~8個成群分布于軟骨陷窩內，這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細胞收縮為不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。
軟骨細胞埋藏在軟骨間質內，它所存在的部位為一小腔，稱為軟骨陷窩（cartilage lacuna）。在HE染色標本上，陷窩周圍的軟骨基質呈強嗜堿性，染色很深，稱軟骨囊（cartilage lacuna）。同源細胞群中的每個軟骨細胞分別圍以軟骨囊。
人軟骨細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。