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qPCR實驗結(jié)果分析基本步驟(三)

時間:2021/10/15閱讀:2194
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未經(jīng)處理的擴增曲線對數(shù)圖如下。


以下情況,基線不需要調(diào)節(jié):

1、樣本擴增曲線剛好在基線最大值的地方開始。

2、濃度最高的樣本,即擴增曲線最快進入指數(shù)期的,Ct值小于15(基數(shù)上限)。


以下情況,基線需要調(diào)節(jié):


1、最高濃度樣本的擴增曲線,起始點在基線最大值前面,表明基線太高。可以將基線結(jié)束值調(diào)小1~2個循環(huán)。

qPCR實驗結(jié)果分析基本步驟(三)2、最高濃度樣本的擴增曲線,起始點距離基線最大值太遠,表明基線太低。可以將基線結(jié)束值調(diào)大1~2個循環(huán)數(shù)。

qPCR實驗結(jié)果分析基本步驟(三)這兩種情況,擴增曲線對數(shù)圖均會出現(xiàn)“破壞斷裂",即圖中紅色圈住的地方。

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