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細(xì)菌培養(yǎng)皿(實驗室設(shè)備)-操作使用
閱讀：7167 發(fā)布時間：2023-7-19
準(zhǔn)備細(xì)菌培養(yǎng)皿
1.準(zhǔn)備瓊脂。瓊脂是用于培養(yǎng)細(xì)菌的果凍狀物質(zhì)。它是從紅藻中提取來的、可為多種細(xì)菌提供豐富營養(yǎng)物質(zhì)并保證細(xì)菌大量繁殖的養(yǎng)料。有些種類的瓊脂中添加了其他促進(jìn)細(xì)菌繁殖的營養(yǎng)物質(zhì)(例如羊血)。
實驗中常用到的瓊脂是瓊脂粉，你只需在每個用來培養(yǎng)細(xì)菌的4英寸培養(yǎng)皿中加入1.2克(大約半茶勺)瓊脂粉即可。
在耐熱碗或隔熱杯中，加入半茶匙的瓊脂粉和60毫升(約1/4杯)的熱水，將其攪拌均勻。如果你打算培養(yǎng)多盤細(xì)菌，你可以用一定倍數(shù)的熱水按比例溶解瓊脂粉來作為細(xì)菌的培養(yǎng)基。
將碗放到微波爐中，加熱沸騰大約1分鐘，取出，待其冷卻至不在沸騰的狀態(tài)。
當(dāng)溶液準(zhǔn)備妥當(dāng)后，瓊脂粉應(yīng)當(dāng)溶解，溶液整體呈清亮不渾濁的狀態(tài)。
待瓊脂粉溶液冷卻幾分鐘后再進(jìn)行后續(xù)步驟。
2.準(zhǔn)備培養(yǎng)皿。培養(yǎng)皿是用透明玻璃或塑料制成的、用來培養(yǎng)細(xì)菌或細(xì)胞等的平底容器。培養(yǎng)皿由皿蓋和皿底組成，其中皿底可插入到皿蓋中。培養(yǎng)皿不僅可以防止外部污濁的空氣污染培養(yǎng)物，還能將細(xì)菌產(chǎn)生的廢氣排出去，從而保證細(xì)菌的繁殖擴(kuò)增。
培養(yǎng)皿在使用前必須被消毒并保持無菌的狀態(tài)，否則會影響實驗的進(jìn)行和結(jié)果。新買的培養(yǎng)皿一般是經(jīng)過預(yù)處理的，都是無菌且被塑料密封包裝的。
打開培養(yǎng)皿的塑料包裝，取出培養(yǎng)皿。打開皿蓋，小心地將較熱的瓊脂溶液倒入培養(yǎng)皿中。倒入溶液的量只需覆蓋皿底，能形成一層培養(yǎng)基即可。
迅速蓋上皿蓋，以防空氣中的細(xì)菌污染培養(yǎng)基。將培養(yǎng)基冷卻30分鐘到2小時，直到瓊脂溶液冷卻并硬化成果凍狀。
3.將培養(yǎng)基冷藏保存。如果你不打算立刻用該培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，那么將其冷藏保存，待到實驗需要時再取出培養(yǎng)細(xì)菌。
將培養(yǎng)基放在冷藏冰箱中保存可以防止培養(yǎng)基中水分的蒸發(fā)(細(xì)菌需要潮濕的生長環(huán)境)。而且還能減緩瓊脂培養(yǎng)基表面變硬的速度，以防在接種細(xì)菌時菌體遭到物理撕扯破裂。
將培養(yǎng)皿儲存在冰箱里時，培養(yǎng)皿需要倒置。這樣可以防止冷凝在皿蓋上的水掉下來破壞細(xì)菌生長平面。
瓊脂培養(yǎng)基可冷藏數(shù)月。在你使用培養(yǎng)基之前，先將其從冷庫中取出，待其溫度到達(dá)室溫后再接種樣品。
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2.培養(yǎng)細(xì)菌
1.將細(xì)菌接種到培養(yǎng)基中。一旦瓊脂培養(yǎng)基凝固成固體或冷藏的培養(yǎng)基恢復(fù)到室溫，接下來你就可以接種細(xì)菌了。接種細(xì)菌的方式有很多，你可以通過直接接觸接種或收集樣品接種等方式來完成。
直接接觸接種:直接接觸接觸就是用含有細(xì)菌的物體直接與培養(yǎng)基接觸，將細(xì)菌傳遞到培養(yǎng)基上。普遍的方式就是將手指(洗手前或洗手后皆可)輕放在培養(yǎng)基上。或者，你可以嘗試剪下一點指甲、一枚舊硬幣、一絲頭發(fā)或一滴牛奶放在培養(yǎng)基上。你可以開動你的想象力，放上任何合適的帶有細(xì)菌的物體。
收集樣品接種:你可以從任何表面收集細(xì)菌樣品，然后將其轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上。該法中，你僅需要一些棉簽。你拿住棉簽一端，并用棉簽棉花那端沾取嘴巴里、門把手上、電腦鍵盤上或者遙控器按鈕等任何你能想到的物體表面的細(xì)菌。然后將其涂在沒有干裂的培養(yǎng)基表面。以上所取樣品的地方都垢藏了大量的細(xì)菌，將其接種培養(yǎng)幾天后，你就能看到有趣的結(jié)果。
如果你愿意，你可以在一盤培養(yǎng)基上接種多個樣品。在接種前，你需要在皿底上標(biāo)記分出四個部分。然后在每個部分接種一個樣品。
2.標(biāo)記并封閉培養(yǎng)皿。當(dāng)你接種完細(xì)菌后，你需要將皿蓋蓋上，并用膠布密封培養(yǎng)皿。
確保在每個培養(yǎng)皿的膠布上用馬克筆標(biāo)注好細(xì)菌來源等信息，否則，幾日之后你將分不清培養(yǎng)細(xì)菌的來源。
你可以將培養(yǎng)皿放入拉鏈袋中，使其得到多層保護(hù)。這樣可以防止?jié)撛谟泻旱那秩耄€不影響培養(yǎng)結(jié)果的觀察。
3.將培養(yǎng)皿放置在溫暖避光的地方培養(yǎng)幾天。細(xì)菌的培養(yǎng)環(huán)境最好是溫暖避光的培養(yǎng)箱。記住在細(xì)菌培養(yǎng)的過程中，培養(yǎng)皿要倒置，這樣可以防止皿蓋的水滴不會滴到培養(yǎng)基上影響細(xì)菌的培養(yǎng)。
培養(yǎng)的最佳溫度是70到98華氏度(即20-37攝氏度)。如果你將培養(yǎng)皿放在溫度較低的環(huán)境中，細(xì)菌的生長速度就會減慢。
細(xì)菌的培養(yǎng)時間最好是4-6天，這樣能讓其得到充分繁殖生長。一旦細(xì)菌開始生長繁殖，你也許能聞到一股的氣味。
4.記錄你的實驗結(jié)果。幾天后，你會發(fā)現(xiàn)每盤培養(yǎng)皿中都長滿了多種多樣、形態(tài)各異的微生物。
在實驗記錄本上記錄你觀察到的培養(yǎng)皿中的微生物。也許你能根據(jù)結(jié)果總結(jié)出哪里的細(xì)菌含量最高。
細(xì)菌最多的地方是你的嘴巴嗎？是門把手嗎？還是遙控器上的按鈕？相信最終的結(jié)果能讓你大吃一驚！
如果你愿意，你可以測量菌落生長的速度。你可以在皿底用馬克筆在菌落周圍畫圈。幾天后，你就能得到一組同心圓。你可以依據(jù)此觀察菌落的增長。
測試抗菌藥物的有效性。本實驗可被改變成一個有趣的實驗，就是在培養(yǎng)皿中加入抗菌劑(洗手液、肥皂等等)以測試抗菌劑的有效性。
當(dāng)你將細(xì)菌接種在培養(yǎng)基上后，用一根棉棒取一滴洗手液、消毒皂或家用漂白劑，滴在樣品中間，然后按步驟培養(yǎng)細(xì)菌。
隨著細(xì)菌的繁殖，你能看到在你滴下抗菌劑的地方形成一圈或一環(huán)沒有細(xì)菌生長的區(qū)域。這就是所謂的“滅菌區(qū)”。
你可以通過對比滅菌區(qū)域的大小來比較殺菌劑的效率。被殺死的細(xì)菌越多，殺菌劑的效果越好。
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3.細(xì)菌的安全處理
1.采取適當(dāng)?shù)陌踩胧Ｔ谀闾幚砼囵B(yǎng)過細(xì)菌的培養(yǎng)皿之前，你需要采取適當(dāng)?shù)陌踩胧﹣肀Ｗo(hù)自己。
盡管你培養(yǎng)的細(xì)菌大多無害，但是大菌落仍有一定的危險。所以在丟棄培養(yǎng)皿之前，你需要用家用漂白劑殺死細(xì)菌。
你需要帶橡膠手套、戴護(hù)目鏡以及穿著實驗服或圍裙以防漂白劑傷害你的雙手、眼睛和衣服。
2.將漂白劑倒入培養(yǎng)皿中。打開培養(yǎng)皿的皿蓋，向培養(yǎng)基上傾倒少量的漂白劑，使其殺死細(xì)菌。
小心不要將漂白劑撒到你的皮膚上，它會灼傷你的皮膚。
將無污染性的培養(yǎng)皿扔到拉鏈塑料袋中，然后扔到垃圾箱中。