亚州一区二区三区中文字幕国产精品-日韩人妻一区二区三区蜜桃视频-亚洲中文字幕久久无码精品-午夜精品亚洲一区二区三区嫩草-日韩人妻一区二区三区蜜桃视频-国产一区二区精品高清在线观看-国产欧美日韩综合精品一区二区

廣州市艾貝泰生物科技有限公司

體外高效電轉化儀的操作要領

時間:2022-7-26 閱讀:8366
分享:
  胞電轉染(電轉),也叫細胞電穿孔(electroporation),是把外源大分子物質DNA、RNA、siRNA、蛋白質等以及一些小分子導入細胞膜內部的重要方法。
 
  體外高效電轉化儀在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質內分到的電壓可以忽略不計,細胞質內部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內的電轉過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質到細胞核等處。
 
  體外高效電轉化儀使用:
 
  1.選擇合適的電場強度合適的電場強度對于電轉染實驗非常重要,電場強度不能過高,過高會增加細胞的死亡率;也不能過低,過低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同細胞系具有不同的*佳場強值,實驗前應測定所轉染細胞系的電場強度。
 
  2.細胞的選擇用于電轉的細胞一般選取處于對數生長期的細胞(15代以內,傳代后2d)。因為處于對數生長期的細胞分裂旺盛,表面結構致密比穩定期的細胞差,電轉后,細胞膜的恢復能力強,而且處于有絲分裂期的細胞更容易接受外源DNA。
 
  3.質粒的質量應選擇純度高的質粒,DNA/RNA應該超純(A260/A280>1.8),其次應不含內毒素,同時質粒應溶于雙蒸水而不是TE緩沖溶液。另外,DNA濃度不宜過高。
 
  4.選擇合適的電轉染試劑電擊會對細胞造成一定程度的傷害,在轉染試劑的選擇上要注意,應選擇具有細胞膜修復成分的電轉染試劑,如Entranster-E,可將電擊對細胞的損傷降低。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話 產品分類
在線留言
主站蜘蛛池模板: 土默特左旗| 闽清县| 开江县| 金寨县| 镇安县| 广丰县| 旬阳县| 雷波县| 邮箱| 吴江市| 五华县| 南投市| 吴堡县| 东台市| 女性| 庄浪县| 页游| 北安市| 南澳县| 顺平县| 海南省| 台中县| 荣成市| 宿松县| 休宁县| 保康县| 长春市| 长顺县| 淮滨县| 怀柔区| 梁平县| 锡林浩特市| 天柱县| 攀枝花市| 龙里县| 贵德县| 大英县| 南安市| 潼关县| 绍兴市| 曲阜市|