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酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。

中文名

酶聯(lián)免疫吸附劑測定

外文名

enzyme linked immunosorbent assay

簡寫

ELISA或ELASA

類型

概念

雙夾心ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒) 此法與雙抗體夾心ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)的主要區(qū)別在于：它是采用酶標(biāo)抗抗體檢查多種大分子抗原，它不僅不必標(biāo)記每一種抗體，還可提高試驗(yàn)的敏感性。此法的基本程序?yàn)椋?/p>

① 加抗體（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干

② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

③ 加用非同種動物生產(chǎn)的特異性抗體（Ab-2）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

④ 加入酶標(biāo)抗Ab-2抗體（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液

⑥ 用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測儀測定OD值。結(jié)果判定 已知陽性血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且已知陽性血清的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下，如果待檢血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待檢血清的OD值≥0.4，則判為陽性，否則判為陰性。