首頁 >> 供求商機
熱啟動 Taq DNA 聚合酶設計用于增強 DNA 擴增的特異性、敏感性和產量。使用該酶可在室溫配制反應體系，使用非常方便。本產品是一種基于化學修飾法的重組熱啟動 Taq DNA 聚合酶，蛋白分子氨基酸殘基上增加了熱不穩定的封閉基團。該酶在室溫下沒有活性，避免形成引物二聚體和非特異性延伸。從而增加 DNA 擴增的特異性。95℃加熱 4 分鐘可恢復酶活性。活化的酶具有與熱啟動 Taq DNA 聚合酶相同的功能：催化 5’→3’方向合成DNA、無可檢測的 3’→5’校正外切酶活性、具有較低的 5’→3’外切酶活性。該酶還具有脫氧核糖核酸酶轉移活性，在 PCR 產物的 3’-端多加 1 個腺嘌呤。活化前檢測不到這些活性。此產品特點是：
1.高產量擴增復雜模板。
2.不需要 95℃加熱 4 分鐘即可激活酶活性。
3.PCR 特異性高-降低錯配效應和減少引物二聚體的生成。
4.增強的 PCR 敏感性。
5.使用方便，室溫配制 PCR 反應體系。
6.擴增產物具有 3’-dA 突出末端。
規格及成分：
| 成 份 | 100 U 包裝 | 500U 包裝 |
| 熱啟動 Taq DNA 聚合酶（2.5 U/μL） | 40 μL | 200μL |
| 10×反應 Buffer | 1 mL | 1 mL |
| 使用手冊 | 1 份 | 1 份 |
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
使用舉例
注意：
以下舉例為常規 PCR 反應系統，僅供參考。實際反應條件因模板、引物等的結構不同而各異，需根據模板、目的片段的大小、堿基序列和引物長
短等具體情況，設定最佳反應條件。10×HotMaster Taq Buffer 中含有 Mg2+，配有濃度為 15 mM MgCl2 。實際 PCR 反應可因模板等的不同酌情向反應體系中添加適量的 Mg2+ ，設置最佳的反應體系。該酶最適延伸溫度為 65℃，可在 60℃-70℃之間調整。
以人基因組 DNA 為模板，護增 1kb 的片段
1. 反應體系的建立：50μL 反應體系如下（可根據比例放大或縮小反應體系）：
Template ＜1μg
Primer 1（10 μM） 1μl
Primer 2（10 μM） 1μl
10×Hot Start Taq Buffer 5μl
dNTP Mixture（2.5 mM） 4μl Hot Start Taq DNA 聚合酶（2.5U/μl） 0.5-1μl ddH2O 補至 50μL
2. PCR 反應循環的設置：
94℃ 2 min
94℃ 20 sec 30 cycles
55℃ 20 sec
65℃ 1 min 65℃ 5min
3. 結果檢測：反應結束后取 5 μl 反應產物，瓊脂糖凝膠電泳檢測。
應用
1. 啟動 PCR。
2. 高產量擴增長達 3kb 片段。
3. RT-PCR
4. 特異性擴增復雜 cDNA 和基因組模板。
5. 擴增低拷貝 DNA 模板。
6. 實時 PCR。
7. 多重 PCR。
8. 制備 TA 克隆用 PCR 產物。
4