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羥自由基清除能力測定試劑盒
微量法
規格：100管/96樣
注意：正式測定前務必取2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
產品內容：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體3mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體3mL×1瓶，4℃保存。
產品說明：
羥自由基作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子，造成細胞結構和功能受損，進而導致體內代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應用。
H2O2/ Fe2+通過Fenton反應產生羥自由基，將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ，導致536nm吸光度下降，樣品對536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了樣品清除羥自由基的能力。
需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
操作步驟：
一、樣品的制備：
1. 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2. 血清、果汁等液體樣品可直接測定。
3. 提取物（或者藥物）可配制成一定濃度，如5mg/mL。
二、操作步驟
1、分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長至536nm，蒸餾水調零。
2、操作表
空白管 | 對照管 | 測定管 | |
試劑一（μL） | 30 | 30 | 30 |
試劑二（μL） | 80 | 80 | 80 |
試劑三（μL） | 20 | 20 | 20 |
立即混勻，防止局部顏色過濃 | |||
樣品（μL） | 50 | ||
試劑四（μL） | 20 | 20 | |
H2O（μL） | 70 | 50 | |
混勻37℃，60min，于微量石英比色皿/96孔板中測定536nm處吸光值，空白管、對照管和測定管的吸光值分別記為A空、A對和A測。 | |||
注意：空白管和標準管只需測定一次。
計算公式：
羥自由基清除率 D% =（A測-A對）÷（A空-A對）×100%
A空、A對、A測：空白管、對照管和測定管的吸光值。
注意事項：
為了比較不同樣品羥自由基清除能力，對于同一批樣品必須加入等量的樣品，血清、組織勻漿、果汁等液體樣品加入同樣體積，提取物（或者藥物）配制成同樣濃度。
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