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分光光度計(jì)分析檢測(cè)家蠶絡(luò)氨酸羥化酶的活性
分光光度計(jì)分析檢測(cè)家蠶絡(luò)氨酸羥化酶的活性
絡(luò)氨酸羥化在多巴胺的合成體系中限速步驟，氧化絡(luò)氨酸為左旋多巴，并進(jìn)一步氧化為多巴胺。目前檢測(cè)絡(luò)氨酸羥化酶活性的分析方法很多，包括放射性同位素化學(xué)法、液相色譜法分析L-dopa的生成、二氧化碳碳十四的捕獲。這些檢測(cè)絡(luò)氨酸羥化酶活性的方法都是可行的選擇，但是這些檢測(cè)方法具有相當(dāng)大的缺點(diǎn)。首先，這些方法是耗時(shí)的，例如液相色譜法分析需要平均每20min采1次樣，導(dǎo)致試驗(yàn)和數(shù)據(jù)分析之間相當(dāng)大的時(shí)間間隔。其次，常見絡(luò)氨酸羥化酶活性的檢測(cè)方法為放射性標(biāo)記法，這些放射性的物質(zhì)需要隔離，需要購(gòu)買昂貴的化學(xué)藥品，并且涉及特殊的處理。如氚釋放實(shí)驗(yàn)要求廣泛地繁瑣后期監(jiān)測(cè)工作，從反應(yīng)混合物中分離氚化水；而另一種方法必須捕獲二氧化碳碳十四，并且檢測(cè)碳十四。這2種檢測(cè)方法都是耗時(shí)而緩慢的，并涉及液體閃爍計(jì)數(shù)。其次，這些方法中測(cè)定每一個(gè)產(chǎn)物的形成發(fā)生在固定的時(shí)間點(diǎn)，不能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)絡(luò)氨酸羥化酶活性。本研究采用基因重組家蠶絡(luò)氨酸羥化酶開發(fā)一種新的是是檢測(cè)方法，通過分光光度法監(jiān)測(cè)產(chǎn)生的L-dopa用以測(cè)量BmTH活性，用高碘酸鈉氧化L-dopa產(chǎn)生多巴色素，其在475nm處有峰值。該方法簡(jiǎn)潔、靈敏、迅速，且對(duì)身體沒有輻射，方便推廣使用，并可用于體內(nèi)、體外TH活性的檢測(cè)。
儀器準(zhǔn)備
UV1700系列 紫外可見分光光度計(jì)
UV1700PC UV Visible Spectrophotometer
簡(jiǎn)介 ： 本產(chǎn)品采用全新設(shè)計(jì)的比例監(jiān)測(cè)雙光束學(xué)系統(tǒng)，具有優(yōu)良的光學(xué)性能，使用方便，是實(shí)驗(yàn)室分析*的基本儀器之一。
應(yīng)用領(lǐng)域： 各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器，應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水、飲用水、加工過程用水、地表水、冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。
測(cè)定結(jié)果：
