細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。既可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，又起到了細(xì)胞保種的作用。那么你知道細(xì)胞凍存的注意事項有什么嗎？讓我們一起來看看吧！
1. DMS0稀釋時會產(chǎn)生巨大的熱量，不能直接添加到細(xì)胞液中，需預(yù)先配制，且DMSO必須是細(xì)胞培養(yǎng)級別的；
2. 緩慢冷凍，使細(xì)胞逐漸脫水，以免因形成巨大的冰晶而受損；
3. 選擇生長良好、密度約為80-90%、活力超過90%的細(xì)胞進(jìn)行凍存；
4. 當(dāng)細(xì)胞密度低于5x105個活細(xì)胞/mL時，復(fù)蘇成功的幾率較低；
5. 不宜長時間將細(xì)胞保存在-80°C的冰箱中。我們建議將其放入液氮中保存，并確保在-80°C的冰箱中保存的時間不超過48小時；
6. 在凍存細(xì)胞操作時，請佩戴防護(hù)眼鏡和手套，以免受到液氮的凍傷；
7. 務(wù)必擰緊凍存管的蓋子，以免在復(fù)蘇過程中滲水，導(dǎo)致支原體污染；
8. 定期檢查液氮儲備，確保所有細(xì)胞浸沒在液體之下；
9. 在每個凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱和凍存時間，并記錄在冊，以避免取錯細(xì)胞或找不到凍存管的情況發(fā)生；
10. 在-20°C的冰箱中將細(xì)胞放置的時間不應(yīng)超過1小時，以防止冰晶過大而損壞細(xì)胞。
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