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熒光定量PCR概念
熒光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時檢測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
SYBR Green I 熒光染料原理
在PCR反應(yīng)體系中加入過量的SYBR熒光染料,SYBR特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完成同步。
熒光定量PCR如何工作?
在擴(kuò)增過程中,熒光信號隨著PCR產(chǎn)物的增加而增加
---在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)
---熒光基團(tuán)在激光的作用下,產(chǎn)生波長更長的發(fā)射光
---利用熒光信號的變化動態(tài)檢測整個反應(yīng)過程
熒光定量PCR應(yīng)用
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