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目錄:北京蘭博利德商貿有限公司>>分子生物學試劑>>PCR相關>> 2×Lab FL PCR Master Mix

2×Lab FL PCR Master Mix
  • 2×Lab FL PCR Master Mix
參考價156-488
具體成交價以合同協議為準

參考價:¥156 ~ ¥488

具體成交價以合同協議為準
  • 品牌
  • 型號
  • 代理商 廠商性質
  • 北京市 所在地
規格

1ML 5ML

屬性

供貨周期:現貨 貨號:FL0201

>
規格
1ML156元9999個 可售
5ML488元9999個 可售

更新時間:2022-08-16 21:06:45瀏覽次數:349評價

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供貨周期 現貨 貨號 FL0201
本產品包含Lab LastLong DNA Polymerase、dNTPs和優化的反應緩沖液,濃度為2×。 使用時只需加入模板、引物,并補足水至Mix終濃度為1×即可。本制品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳;也可經過純化處理,以用于酶切、連接、熒光測序等后續操作。

2×Lab FL PCR Master Mix


產品貨號:FL0201

儲存條件:-20°C 保存2年。短時間(1個月內)使用可以置4°C。

產品說明

本產品包含Lab LastLong DNA Polymerase、dNTPs和優化的反應緩沖液,濃度為2×。 使用時只需加入模板、引物,并補足水至Mix終濃度為1×即可。本制品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳;也可經過純化處理,以用于酶切、連接、熒光測序等后續操作。PCR產物為3,A頭純化后可直接用LABLEAD LabpO TOPO TA系列載體(貨號:PA0101、PA0102)克隆

產品特點

1、超快的擴增速度:延伸速度可以達到5-10sec/kb最短半小時完成PCR

2、突出的長片段擴增能力可擴增高達10kb的長片段(包括人類基因組此類的復雜模板)

3、良好保真性:保真度是taq的3倍以上。

4、強大的擴增能力產量高,對于一些有特殊結構的復雜模板和GC含量高模板有良好效果。

建議PCR 體系設置

Component

25 μl Reaction

50 μl Reaction

Final Concentration

2x Lab FL PCR mix  

12.5 μl

25 μl

1 ×

Forward Primer(10 μM)    

0.5 μl

1 μl

0.2 μM

Reverse Primer(10 μM)      

0.5 μl

1 μl

0.2 μM

Template DNA

as required

as required


ddH2O  

up to 25 μl

up to 50 μl



參考模板用量(50 μl反應體系)

質粒:0.1-10ng;細菌基因組:10-100ng;人類基因組:50-150ng;cDNA:1-5μl from RT reaction。

建議PCR循環條件

Step

Temperature

Time

Cycle Number

Initial denaturation

94oC

2-3 min


Denaturation

94oC

10 s


25-35 cycles

Annealing

55oC

10-15s

Extension

72oC

10 s/ kb

Final Extension

72oC

1-5 min



4-8oC

Hold


注意事項

1.本品擴增速度快, 質粒和簡單基因組等簡單模板可以嘗試5s/kb延伸速度并采用減少循環數以進一步縮短PCR時間長片段(大于等于3kb)或者復雜模板產量較低應采用15-20s/kb延伸速度或者采用較多循環數。

2.Lab FL產量較低時可嘗試采用較長的延伸時間(如20s/kb)和循環數(如35個)可以提高產物產量

3.對于GC含量很高的模板,短片段預變性和變性溫度可以提高到98 oC/或適當延長變性時間長片段為了避免DNA損傷不應該提高變性溫度,應該適當延長預變性時間到5min.,變性時間可以延長5-10s。

4.如果擴增模板GC含量高或者模板復雜擴增效果不佳時,可在反應混合物中加入DMSO到終濃度1%-8%,按照1%梯度增加摸索best濃度。或者加入甜菜堿至終濃度1.0-1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)





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